תגובת שרשרת פולימראז (PCR) באבחון של מחלות זיהומיות

PCR - אחת השיטות לאבחון DNA המאפשר להגדיל את מספר העותקים של חלק לגילוי של הגנום (DNA) של חיידקים או וירוסים הוא פי מיליון באמצעות אנזים DNA פולימרז. מבחן עבור פלח חומצות גרעין גנומי הספציפי הזה מוכפל שוב ושוב (מוגבר) המאפשר זיהוי שלו. ראשית, מולקולת DNA של חיידקים או וירוסים על ידי חימום מחולקת לשתי שרשרות, אז בנוכחות פריימרים DNA המסונתז (הרצף של נוקלאוטידים ספציפי הגנומי המוגדר) מחייב אותם עם רצועות משלימים של DNA, מסונתז הגדיל השני של חומצות גרעין אחרי כל פריימר בנוכחות של DNA פולימרז thermostable . שני מולקולות דנ"א מתקבלים. התהליך חוזר על עצמו פעמים רבות. לקבלת אבחנה, רק מולקולת הדנ"א אחד, למשל חיידק אחד או חלקיק וירוס. בתגובת צעד נוסף - סינתזת DNA על מולקולת RNA באמצעות האנזים transcriptase הפוכה - אפשר לבדוק וירוסי RNA כגון וירוס HCV. PCR - תהליך תלת-שלבי, מחזורים חוזרים ונשנים של denaturation, חישול של פריימרים, סינתזה DNA (פילמור). כמות ה- DNA המסונתזת זוהתה על ידי ELISA או אלקטרופורזה.

PCR יכול לשמש חומר ביולוגי שונה - סרום או פלזמה דם, גירוד של השופכה, ביופסיה, נוזל צדר, הנוזל השדרתי, וכו ' הראשון PCR שימש לאבחון של מחלות זיהומיות כגון B צהבת נגיפית, C צהבת נגיפית, D צהבת נגיפית, זיהום CMV, זיהום המועברות במגע מיני זיהומיות (זיבה, אשפה diynaya, mycoplasma, זיהום ureaplasma), שחפת, איידס - זיהום, וכו '

היתרון של PCR באבחון של מחלות זיהומיות על שיטות אחרות של המחקר הוא כדלקמן:

• הסוכן הסיבתי של ההדבקה ניתן למצוא בכל סביבה ביולוגית של הגוף, כולל החומר המתקבל על ידי ביופסיה;
• ניתן לאבחן מחלות מדבקות בשלבים הראשונים של המחלה;
• הערכה כמותית של תוצאות המחקר אפשרי (כמה וירוסים או חיידקים כלולים בחומר הנחקר);
• רגישות גבוהה של השיטה; לדוגמה, הרגישות של PCR לגילוי של ה- DNA של נגיף הפטיטיס B בדם היא 0001 pg / ml (כ 4 × 10 ² עותקים / מ"ל), ואילו הרגישות של השיטה הכלאה דנ"א באמצעות בדיקות הקנים - 2.1 pg / ml (כ 7 × 10 ⁵ עותקים / מ"ל).

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]