בדיקת דם לנגיף אפשטיין-בר לנוגדנים ו-PCR: כיצד לעבור, נורמות

הרפס הוא פריחה שלפוחיתית כואבת ומכוערת על הפנים באזור השפתיים, אשר לאחר מכן יוצרות קרום חום. למרבה הצער, זהו רק אחד משני הסוגים של נגיף ההרפס, שיכול להופיע בבני אדם ב-8 צורות. מה שאנו מכנים בדרך כלל הרפס הוא נגיף מסוג 1, או נגיף הרפס סימפלקס. נגיף מסוג 2 גורם להרפס גניטלי, נגיף מסוג 3 - "אבעבועות רוח" ורעפים, נגיף מסוג 4 - מונונוקלאוזיס זיהומית וכמה פתולוגיות מסוכנות למדי, וכו'. רשימה זו יכולה להימשך עוד יותר, אך נתמקד בנגיף הרפס מסוג 4, המכונה גם נגיף אפשטיין-בר. בואו ננסה להבין מהו נגיף הרפס מסוג 4, מדוע הוא מסוכן, מתי ומדוע מבוצעת בדיקת נגיף אפשטיין-בר, ומה מצביעות תוצאות בדיקות המעבדה.

מהו נגיף הרפס מסוג 4?

נגיף הרפס מסוג 4, כאחד מזני זיהום ההרפס, תואר לפני 53 שנים על ידי הווירולוג האנגלי מייקל אפשטיין. בעבודתו על הפרויקט, נעזר הפרופסור בתלמידתו לתואר שני איבון בר. לאנשים אלה חייב הנגיף את שמו. עם זאת, 15 שנים לאחר גילוי הנגיף, שונה שמו המדעי להרפס-נגיף אנושי 4, ולפני שנה נקרא הנגיף גמא-נגיף אנושי מסוג 4.

אבל מהו נגיף אפשטיין-בר? כמו כל נגיף אחר, הוויריון (חלקיק ויראלי) של נגיף הרפס מסוג 4 מורכב מחומר גנטי (במקרה זה, DNA דו-גדילי) ומקלפת חלבון מקיפה (קפסיד). בנוסף, הנגיף מוקף בקרום המסייע לו לחדור בקלות לתאי הפונדקאי.

כל וירוס הוא צורה לא תאית, שהיא גורם זיהומי ואינו יכול להתפתח ולהתרבות מחוץ לתאים של אורגניזם חי. בית הגידול המועדף על נגיף הרפס מסוג 4 נחשב לתאי האפיתל של האף והלוע. הם גם אינם מזלזלים בלויקוציטים, ומעדיפים אחד מהזנים שלהם, הנקראים לימפוציטים מסוג B. תאי B הם אלו שמשתתפים באופן פעיל במתן ההגנה החיסונית של הגוף. במגע עם אנטיגן, שבמקרה שלנו הוא נגיף הרפס מסוג 4 (או ליתר דיוק האנטיגנים שלו), לימפוציטים מסוג B מייצרים נוגדנים (חלבוני אימונוגלובולין). ניתן לזהות אותם בדם החולה על ידי ביצוע ניתוח לנגיף אפשטיין-בר (EBV).

לנגיף הרפס מסוג 4 יש 4 אנטיגנים המופיעים ברצף מוגדר בקפדנות:

• EA הוא אנטיגן מוקדם המופיע בשלב הראשוני של המחלה, כאשר חלקיקי הנגיף נמצאים בשלב הסינתזה (זיהום אקוטי ראשוני או הפעלה מחדש של נגיף סמוי כאשר החסינות מופחתת),
• VCA הוא אנטיגן קפסידי הכלול בקליפת החלבון וגם שייך למוקדמים, מכיוון שהמחלה עשויה אפילו לא להתבטא בתקופה זו.
• MA - אנטיגן ממברנלי, מופיע כאשר הוויריון כבר נוצר,
• EBNA – אנטיגן גרעיני (פוליפפטיד או גרעיני) הוא אחד האנטיגנים המאוחרים, שנוגדנים אליהם ניתן לאתר אפילו מספר חודשים לאחר המחלה והם נשארים בדם לאורך כל החיים.

נגיף הרפס מסוג 4 הוא ערמומי מאוד. מכיוון שהנגיף אינו פעיל מחוץ לאורגניזם חי, ניתן להידבק בו רק מאדם שהוא מקור הזיהום. ואין צורך כלל שהוא או היא יפגינו את כל תסמיני המחלה; הזיהום יכול להיות סמוי, במסווה של עייפות רגילה. לדוגמה, תסמונת עייפות כרונית קשורה ברוב המקרים לנגיף אפשטיין-בר.

ניתן למצוא ויריונים בודדים בדם, רוק, זרע, הפרשות נרתיקיות ורקמות של איברים שונים. חלקיקי וירוס, יחד עם רוק ודם, יכולים לחדור לעצמים סביבנו, שם הם יישארו לא פעילים עד שייכנסו איכשהו לגוף האדם. ברוב המכריע של המקרים, ההדבקה מתרחשת באמצעות טיפות הנישאות באוויר או מגע (דרך נשיקות). אך העברה תוך רחמית של הווירוס מהאם לעובר, הדבקה במהלך עירוי דם (אם דם התורם הכיל ויריונים של הווירוס) ומגע מיני גם אפשריים.

לאחר חדירת המחלה לגוף וחדירה למבנים תאיים, עשויים לחלוף בין 5 ל-50 ימים עד שהמחלה תתבטא. אך ייתכן שהיא לא תתבטא, אלא תתקדם בצורה סמויה, כפי שקורה ברוב המקרים.

כן, לפי מחקרים, כ-90% מהאוכלוסייה הבוגרת סבלה מזיהום הרפס הקשור לנגיף ה-EBV לפחות פעם אחת בחייהם. רוב האנשים אפילו לא יודעים זאת מכיוון שגופם מסוגל להילחם בהתקפה הוויראלית. אבל זה לא תמיד המצב.

כיצד מתבטא נגיף אפשטיין-בר?

לרוב, רופאים נאלצים להתמודד עם הסוגים הבאים של זיהום הרפס מסוג 4 בעבודה שלהם:

• צורה כרונית (מתרחשת לאחר השלב החריף של המחלה, יש לה כמה תסמינים כלליים של בריאות לקויה),
• צורה סמויה או נסתרת (אין תסמינים, אך הנגיף נשאר פעיל ומשתחרר לסביבה),
• צורה איטית (פחות שכיחה, תסמינים מופיעים אחד בכל פעם לאורך תקופה ארוכה, מסתיימים במותו של המטופל).

אנשים נדבקים לראשונה בנגיף אפשטיין-בר, בעיקר בילדות ובגיל ההתבגרות. שיא התחלואה מתרחש בין הגילאים 14 ל-18.

לזיהום ויראלי ראשוני יש 3 צורות שונות:

• אסימפטומטי (ללא ביטויים קליניים),
• נשימתי (תסמינים של זיהום בדרכי הנשימה: חום, הפרשות מהאף, חולשה כללית וכו'),
• מונונוקלאוזיס זיהומית עם שלישיית תסמינים עיקריים: חום גבוה, סימני כאב גרון עם קרום צהבהב על השקדים, הגדלה של איברים כמו כבד וטחול; יש עלייה ברמת הלויקוציטים והגדלה של בלוטות הלימפה.

ישנן מספר אפשרויות לצאת מהשלב האקוטי של המחלה:

• החלמה מלאה,
• תסמיני המחלה נעלמים, אך הנגיף נשאר בגוף ומתפתח, אם כי הוא כבר לא מוביל לשינויים ניכרים בתאים (מצב נשא),
• אין תסמינים של המחלה, הנגיף אינו עוזב את הגוף, אך גם מראה פעילות מועטה (צורה סמויה),
• הפעלה מחדש של הנגיף מצורה סמויה,
• מהלך כרוני של זיהום (עם התקפים של המחלה, צורה כרונית פעילה, מוכללת עם נזק לאיברים ולמערכות הגוף).

התוצאה של שהייה ממושכת של הנגיף בגוף יכולה להיות:

• צורה כרונית של מונונוקלאוזיס זיהומית.
• תסמונת המטופגוציטית: חום יציב, ירידה במרכיבי הדם (קרישה מוגברת), הגדלת כבד וטחול, דימום בריריות, צהבת (עקב תפקוד לקוי של הכבד), הגדלת בלוטות לימפה, תסמינים נוירולוגיים.
• צורה סמויה עם התפתחות של חוסר חיסוני משני: היפרתרמיה לאורך זמן, חולשה כללית, הגדלה וכאב של בלוטות הלימפה, כאבי שרירים ומפרקים, מחלות זיהומיות תכופות.
• התפתחות של פתולוגיות אוטואימוניות בצורה של זאבת אדמנתית, דלקת מפרקים שגרונית וכו'.
• ביטויים של תסמונת עייפות כרונית עם הידרדרות במצב הרוח והביצועים הכלליים.
• צורה כללית של זיהום כרוני עם נזק למערכת העצבים המרכזית, שריר הלב, הכליות, הכבד והריאות.
• התפתחות של מחלות אונקולוגיות (לוקמיה לימפוציטית ולימפומות), בהן נצפית עלייה פתולוגית במספר תאי מערכת הלימפה. נגיף הרפס מסוג 4 אינו הורס תאי נשאים, אלא מאלץ אותם להתרבות באופן פעיל, וכתוצאה מכך מתגלות גידולים מרקמת הלימפה.

כפי שניתן לראות, נגיף אפשטיין-בר אינו מזיק כפי שהוא נראה במבט ראשון, מה שאומר שאין לטפל בו ברשלנות. יתר על כן, נגיף הרפס מסוג 4 מאופיין באירועים תכופים של נשיאת הנגיף ובצורה סמויה, שלא לדבר על צורות שונות של זיהום כרוני, כאשר אדם נשאר מקור זיהום מבלי לחשוד בכך כלל.

במקרה זה, נוכחות של גורם זיהומי בגוף יכולה להיקבע רק באמצעות ניתוח מיוחד לנגיף אפשטיין-בר, שהחומר הביולוגי שלו הוא בדרך כלל דם.

אינדיקציות להליך בדיקת וירוס אפשטיין-בר.

מכיוון שלעיתים קשה לאתר זיהום בהרפסווירוס מסוג 4, לא תמיד נחשד בו. אך ישנם סימנים מסוימים לפיהם רופא עשוי לחשוד בנוכחות הנגיף בגוף:

• מערכת חיסונית מוחלשת מאוד (חולים עם זיהום HIV ואיידס, חולים לאחר השתלת איברים או כימותרפיה נמצאים בסיכון),
• הגדלה של בלוטות לימפה אזוריות בסנטר ובאזור העורף של הראש וכאבן, במיוחד אם זה נצפה לאחר עירוי דם או השתלת איברים מתורם.
• זיהום נגיפי נשימתי חריף (ARVI), המתרחש על רקע טמפרטורות גבוהות מאוד (38-40 מעלות),
• הופעת סימנים של מונונוקלאוזיס זיהומית, אשר מתרחשת לרוב תחת השפעת נגיף אפשטיין-בר.

גם אם לאדם אין את התסמינים שהוזכרו לעיל, מומחה עשוי לחשוד בהתבסס על תוצאות מסוימות של בדיקות שגרתיות (בדיקת דם כללית וביוכימיה), כמו גם בדיקות מצב חיסוני.

ספירת דם מלאה לאיתור נגיף אפשטיין-בר עשויה להראות:

• עלייה במספר הלימפוציטים,
• המוגלובין נמוך, דבר המעיד על ירידה ברמת כדוריות הדם האדומות,
• קרישת דם מוגברת עקב מספר רב של טסיות דם,
• הופעת וירוציטים (לימפוציטים לא טיפוסיים הדומים במבנה למונוציטים).

בדיקת דם ביוכימית, המספקת מידע על מצב האיברים הפנימיים, תראה שינויים בתפקוד הכבד והטחול.

בדיקת אימונוגלובולין ל-EBV עשויה להראות שינוי במספר הלימפוציטים הספציפיים, פער במספר האימונוגלובולינים מסוגים שונים (דיסימונוגלובולינמיה) וחסר באימונוגלובולין G, דבר המצביע על מערכת חיסונית חלשה וחוסר יכולתה להכיל את מתקפת הנגיף.

תוצאות כאלה של ניתוחים לא ספציפיים עשויות להזהיר רופאים, אך עדיין אי אפשר לומר בדיוק עם מה הם מתמודדים. הכל יישאר בשלב ההנחות והאבחון הראשוני. ברוב המקרים, רופאים חושדים בצורה סמויה של מונונוקלאוזיס זיהומית, אם כי פתולוגיות ויראליות אחרות (שפעת, דלקת כבד וכו') יכולות להתבטא באותו אופן.

בשל השכיחות הגבוהה של דלקת כבד מסוג 4 והאפשרות להעברה מאם לילד, בדיקת נגיף אפשטיין-בר תהיה שימושית גם בעת תכנון הריון. אם האם סבלה בעבר מהזיהום, גופה פיתח נוגדנים אליו. הדבקה חוזרת בדרך כלל נשללת עקב היווצרות חסינות חזקה, ואם היא אכן מתרחשת, לא יהיו לה עוד ההשלכות האפשריות במפגש הראשון עם הנגיף. חסינות תרסן את פעילות הנגיף לאורך כל החיים, אם כי הנגיף עצמו יישאר בתוך הגוף, כמו כל נגיפי הרפס.

אם האם המצפה נדבקת בנגיף ההרפס במהלך ההריון, הדבר עלול להוביל להפלות וללידה מוקדמת, או שהנגיף ישפיע לרעה על התפתחותו התוך רחמית של התינוק.

אונקולוג עשוי להזמין בדיקת EBV אם יש חשד ללימפומה של בורקט או לאבחון תהליכי גידול אצל אנשים עם HIV. מטפל עשוי להשתמש בבדיקה זו לאבחון זיהומי הרפס (אבחון מבדל לקביעת סוג הנגיף). לעיתים הבדיקה משמשת גם להערכת יעילות הטיפול.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

הכנה

בהתאם לסוג המחקר, החומר הביולוגי עבורו יכול להיות דם, רוק, שתן, כיח, דגימת מי שפיר, גירוד מתעלת צוואר הרחם או מהשופכה, נוזל מוחי שדרתי (CSF). לרוב, רופאים פונים לבדיקת דם, הנחשבת לאינפורמטיבית ביותר.

ברור שגורמים מסוימים עשויים להשפיע לרעה על איכות וכמות החומר הביולוגי, לכן כדאי לפעול לפי כללים מסוימים יום קודם לכן:

• מומלץ לבצע כל בדיקה (במיוחד בדיקות דם) בבוקר על קיבה ריקה. הארוחה האחרונה צריכה להיות לא יאוחר מ-12 שעות לפני לקיחת הדם, לכן עדיף לשתות מים לארוחת ערב.
• החומר המקובל ביותר לניתוח נגיף אפשטיין-בר נחשב לדם ורידי, ולפני תרומת דם מווריד, מומלץ תמיד מנוחה של 15 דקות אם אדם הגיע זה עתה למעבדה,
• כדי להבטיח שדגימות הדם יתקיימו ללא השלכות ותוצאות הבדיקה אמינות, לא מומלץ לבצע עבודה פיזית פעילה או לעסוק בספורט, לשתות אלכוהול או לעשן ב-12 השעות שלפני ההליך.
• תוצאות הבדיקות עשויות להיות מושפעות גם מהתרופות שאתה נוטל. עליך להפסיק ליטול תרופות לפחות יומיים לפני הבדיקה. אם זה לא אפשרי, עליך ליידע את אחות המעבדה על התרופות שאתה נוטל.
• במהלך ההריון, לפני בדיקת EBV, מבוצעת בדיקת טוקסופלזמוזיס כדי לשלול תגובה חיובית כוזבת.
• אם נעשית בדיקת דם לנגיף אפשטיין-בר לילד מתחת לגיל 5, יש לתת לילד לשתות הרבה מים רותחים במנות קטנות יחסית חצי שעה לפני ההליך.

אם נלקח חומר ביולוגי נוסף לניתוח, עליך להבהיר מראש עם הרופא שלך את כל הניואנסים של ההכנה לניתוח בהתאם לחומר בו נעשה שימוש.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

טֶכנִיקָה בדיקת וירוס אפשטיין-בר.

רופאים מייחסים תפקיד חשוב באבחון הרפס מסוג 4 ומונונוקלאוזיס זיהומית לבדיקות ספציפיות המסייעות בזיהוי ה-DNA של הנגיף או נוגדנים ייחודיים בחומר הביולוגי של המטופל. הסוגים העיקריים של בדיקות מעבדה המשמשות לגילוי נגיף אפשטיין-בר בגוף האדם כוללים בדיקת ELISA (אנזים-קושר אימונוסורבנט) ואבחון PCR. בואו נבחן מקרוב את מהות שתי השיטות ואת מאפייני יישומן.

אימונו-אסאי אנזים EBV

ELISA הוא מחקר (אנליזה) של דם ורידי של חולים לאיתור נוגדנים לנגיף אפשטיין-בר. כתוצאה מהאבחון, מתגלים אימונוגלובולינים מסוג IgG או IgM (ישנם 5 סוגים בסך הכל) לאחד משלושת האנטיגנים של הנגיף (מוקדם, קפסידי או גרעיני) בדם של חולים עם EBV.

הניתוח מתבצע במעבדה אימונולוגית, שם נלקחים כ-10 מ"ל של דם מווריד המטופל. לאחר מכן, החומר הביולוגי נשאר בטמפרטורת החדר למשך רבע שעה, ובמהלכן הדם נקרש. הקריש מופרד בזהירות מהחלק הנוזלי. הנוזל עובר צנטריפוגה ומתקבל סרום דם טהור. זהו זה שנבדק בהמשך.

הרעיון של השיטה התפתח על סמך נתונים לפיהם גופנו מייצר נוגדנים ספציפיים לכל סוג של וירוס וחיידק החודרים לגוף מבחוץ. הגוף מזהה אותם כזר ומשמיד אותם בעזרת נוגדנים ייחודיים הנצמדים היטב לאנטיגן.

מהות ניתוח ה-ELISA מבוססת על תגובה זו. נוגדנים עם תגיות המחוברות אליהם מתחברים לאנטיגנים. חומר מוחל על התגיות, אשר משנה את צבע הדגימה כאשר הוא מגיב עם אנזים מיוחד. ככל שיש יותר "שרשראות" כאלה, כך צבעו של החומר הביולוגי עז יותר.

ניתן לבצע בדיקת אימונו-אנזים באמצעות שלוש שיטות:

• ELISA ישיר. נוזל הבדיקה מוכנס לבורות ומשאיר למשך כחצי שעה כדי שהאנטיגנים יוכלו להיקשר לדפנות הבאר. נוזל עם נוגדנים מסומנים מוסיף לאנטיגנים שנספגו. לאחר הזמן הנדרש (מחצי שעה עד 5 שעות), כאשר הנוגדנים זוהו ונקשרו לאנטיגנים, הנוזל מסונן, הבארות נשטפות בזהירות ומוסיפים אליהן את האנזים. ריכוז הנגיף ביחידת דם נקבע באמצעות שיטת הצביעה.
• ELISA עקיף. בשיטה זו, סרום הדם הנבדק ונוגדנים מסומנים מוסיפים לאנטיגנים הנספגים על פני השטח של הבארות. כתוצאה מכך, מתקבלים 2 סוגי רצועות, שחלקן מסומנות. התוצאה תלויה בריכוז האנטיגנים בדגימה הנבדקת. ככל שיש יותר נוגדנים לא מסומנים, כך פחות תרכובות מסומנות על ידי האנזים.

לאחר מכן, מוסיפים להרכב השטוף ריאגנט מיוחד, המשמש לקביעת הפעילות האנזימטית של קומפלקסים של אנטיגן-נוגדן.

• "סנדוויץ'". שונה מהשיטה העקיפה בכך שבתחילה, לא אנטיגנים, אלא נוגדנים נספגים על פני השטח. מוסיפים להם תמיסה המכילה את האנטיגנים הנחקרים. לאחר שטיפת הנשא, מוסיפים נוגדנים עם תוויות אנזימטיות. עודפי נוגדנים מוסרים שוב ובאמצעות מי חמצן מתקבל חומר צבעוני, הנחקר בשיטה ספקטרומטרית.

סוג זה של ניתוח מאפשר לא רק לזהות נוגדנים ספציפיים ולקבוע את ריכוז האנטיגנים, אלא גם להבהיר את שלב המחלה. העובדה היא שאנטיגנים שונים של נגיף אפשטיין-בר מופיעים בשלבים שונים של זיהום הרפס, מה שאומר שנוגדנים אליהם מיוצרים בתקופה מסוימת של המחלה.

לפיכך, נוגדנים מסוג IgG לאנטיגן המוקדם (IgG EA) מופיעים בדם 1-2 שבועות לאחר ההדבקה, כאשר המחלה נמצאת בשלב החריף או בשלב של הפעלה מחדש של הנגיף. אימונוגלובולינים מסוג זה נעלמים לאחר 3-6 חודשים. במהלך הכרוני של זיהום ויראלי, נוגדנים כאלה רבים במיוחד, ובצורה הלא טיפוסית, הם נעדרים לחלוטין.

נוגדנים מסוג IgG לאנטיגן הקפסיד (IgG VCA) מופיעים גם הם מוקדם, במהלך 4 השבועות הראשונים של המחלה, אך מספרם הגדול ביותר נקבע בחודש השני של ההדבקה. בשלב האקוטי, הם נמצאים אצל רוב החולים, אך ייתכן שהם לא יופיעו אצל ילדים. במהלך הכרוני של המחלה, במיוחד בתקופות של הפעלה מחדש של הנגיף, כמות ה-IgG VCA גבוהה במיוחד. נוגדנים אלה נשארים בדם האדם לנצח, כמו הנגיף עצמו, דבר המעיד על חסינות שנוצרה לגורם המדבק.

נוגדנים מסוג IgM לאנטיגן קפסיד (IgM VCA) עשויים להופיע עוד לפני הסימנים הראשונים של המחלה. ריכוזם (טיטרים) גבוה במיוחד בששת השבועות הראשונים של המחלה. סוג זה של נוגדן אופייני לזיהום חריף ולהפעלה מחדש של זיהום כרוני. נוגדנים מסוג IgM VCA נעלמים לאחר 1-6 חודשים.

נוגדנים מסוג IgG לגן הגרעיני (IgG EBNA) עשויים להצביע על כך שאדם נתקל בעבר ישירות בזיהום הרפס. בשלב האקוטי של המחלה, הם מתגלים לעיתים רחוקות ביותר, בדרך כלל מופיעים במהלך תקופת ההחלמה (בחודשים השלישי-עשירי). ניתן לזהות אותם בדם מספר שנים לאחר ההדבקה.

גילוי של אנטיגנים בודדים אינו מספק תמונה מלאה של המחלה, לכן יש לבצע בדיקות לנוגדנים שונים יחד. לדוגמה, אם קיים רק IgM VCA, ולא מתגלה IgG EBNA, מדובר בזיהום ראשוני.

למרבה הצער, בדיקת אימונו-אנזים לעיתים קרובות אינה מספיקה כדי לזהות זיהום הרפס ראשוני או פתולוגיה מולדת. במקרה האחרון, ייתכן שלא יתגלו נוגדנים כלל. כבדיקה לאישור מחלה ראשונית, נעשה שימוש במחקר מולקולרי של דם או חומר ביולוגי אחר לאיתור נגיף אפשטיין-בר.

ניתוח PRC עבור נגיף אפשטיין-בר

ניתוח זה מתבצע בשלב של זיהום ראשוני חריף, אחרת התוצאה שלו תהיה שגויה.

מהות שיטת ה-PCR (תגובת שרשרת רב-ממדית) היא שלכל גורם זיהומי יש קבוצה משלו של גנים הכלולים במולקולת DNA. ה-DNA של הפתוגן נמצא בחומר הביולוגי שנלקח למחקר בכמויות קטנות (הווירוסים עצמם הם מיקרוסקופיים בגודלם), ולכן קשה מאוד להעריך את המצב. אבל אם מתבצעת תגובה ספציפית, כמות החומר הגנטי תגדל משמעותית, מה שיאפשר לקבוע את שם הפתוגן.

באמצעות מכשירים חד פעמיים, נלקח חומר למחקר מולקולרי, אשר מוכנס למכשיר מיוחד לניתוח. המכשיר הוא תרמוסטט עם תוכנית מיוחדת - מחזור תרמי או מגבר. המכשיר מפעיל מחזור PRC מלא כמה עשרות פעמים (כ-2-3 דקות), הכולל 3 שלבים:

• דנטורציה (בטמפרטורה של 95 מעלות, גדילי ה-DNA מופרדים).
• חישול (בטמפרטורה של 75 מעלות, מוכנסים לחומר הנחקר "פריימרים" שהוכנו במיוחד עבור EBV, אשר נצמדים ל-DNA של הנגיף).
• הרחבה או ריבוי של חומר גנטי (אנזים מיוחד מתווסף לזרע בטמפרטורה של 72 מעלות, אשר יוצר מחדש שרשרת DNA חדשה, ובכך מכפיל את כמות החומר הגנטי).

אם מחזור התגובה הרב-ממדית יבוצע 50 פעמים, כמות החומר תגדל פי 100. משמעות הדבר היא שיהיה הרבה יותר קל לזהות את הפתוגן.

בדיקת וירוס אפשטיין-בר לילד

כפי שאנו כבר יודעים, נגיף אפשטיין-בר יכול לגרום להתפתחות של מחלות רבות. לאחר שהוא נכנס לגוף האדם, הוא נשאר תושב קבע, ורק עבודה מתואמת היטב של מערכת החיסון אינה מאפשרת לו לטפיל באופן פעיל בתוך תאים.

כמעט 95% מאוכלוסיית העולם הבוגרת חיה עם EBV בפנים, ורובם הכירו את הנגיף בילדות המוקדמת. חלקם ירשו אותו מאמם, בעוד שאחרים נדבקו בנגיף מהורים וקרובי משפחה שמיהרו לילד בנשיקות, או בטיפות מוטסות בגן או בבית הספר (מחלות זיהומיות שם בדרך כלל רוכשות פרופורציות "אוניברסליות").

ילדים קטנים נוטים בדרך כלל להכניס הכל לפה, והמספר הגדול ביותר של וירוסים נמצא ברוק. ואם כמה ילדים מלקקים את אותו צעצוע בגן בזמן שהגננות עסוקות בעניינים שלהן, אז אין זה מפתיע שהנגיף מתפשט בצורה כה פעילה בקבוצות גדולות של ילדים.

ניתן בקלות לכנות את EBV מחלה של ילדים ובני נוער, משום שעד גיל ההתבגרות, מחצית מהילדים כבר נושאים את הנגיף בגופם (ובגיל 30, כ-90% מהמבוגרים). ילדים בגילאים שונים חולים בדרכם שלהם. עד גיל שנה, בעוד שהילד אינו מתקשר באופן פעיל עם אנשים, ההסתברות שהוא יחלה קטנה. ילד מעל גיל שנה, גם אם לא הלך לגן, הופך חברותי יותר, משחק עם בני גילו ברחוב, יוצא לקניות פעילות עם אמו וכו', וההסתברות להידבק בנגיף הופכת גבוהה בהרבה.

אבל זו לא סיבה לנעול את הילד בין 4 קירות. בגילאי 1-3 שנים, המחלה ברוב המכריע של המקרים מתקדמת ללא כל תסמינים, אולי למעט עלייה קלה בטמפרטורה ונזלת קלה, המזכירה הצטננות. מסתבר שככל שהילד מתוודע לנגיף מוקדם יותר, כך היכרות כזו מתקדמת בקלות רבה יותר.

זה לא טוב אם ילד חולה ללא הופעת נוגדנים מסוג IgG VCA בדם, מה שעשוי להעיד על כך שלא נוצרה חסינות לנגיף, והפעלה מחדש של הנגיף אפשרית ברגע שמערכת החיסון נחלשת. הסיבה לכך היא ככל הנראה חוסר שלמות של מערכת החיסון של ילדים קטנים, שנמצאת בתהליך היווצרות מזה מספר שנים.

חיי בית הספר מספקים תנאים מוקדמים נוספים למחלה, במיוחד בגיל ההתבגרות, כאשר צעירים מתרגלים באופן פעיל נשיקות. אבל אצל ילדים מעל גיל 3, המחלה היא בתדירות נמוכה יותר אסימפטומטית. ברוב המקרים, רופאים נתקלים במונונוקלאוזיס זיהומית עם תסמינים אופייניים לה.

למרות העובדה שהפתולוגיה יכולה להימשך זמן רב (כחודשיים), היא אינה מסוכנת כל כך ואינה דורשת שימוש בתרופות רציניות. רופאים רושמים תרופות אנטי דלקתיות ואנטי-ויראליות, אם מצטרף זיהום חיידקי, הם פונים לעזרה מאנטיביוטיקה. אגב, פניצילין אינו מומלץ במקרה זה בשל העובדה שהם עלולים לעורר הופעת פריחה בעור.

אל תחשבו שאם ילד או נער חולה במונונוקליוזיס זיהומית, זה אומר שנגיף אפשטיין-בר התמקם בגופם. למחלה יש פתוגנים פחות נפוצים אחרים, כמו ציטומגלווירוס (נגיף הרפס מסוג 5). כדי להבין עם מה הם מתמודדים, רופאים רושמים בדיקת נגיף אפשטיין-בר, ובמידת הצורך, בדיקות מעבדה נוספות.

נכון גם שמונונוקלאוזיס זיהומית אינה הביטוי היחיד של EBV בילדות. ישנן מחלות נוספות הקשורות לפתוגן זה, אך באזורנו הן נדירות.

לפיכך, לימפומה של בורקיט (שזו הסיבה ש-EBV חבה את גילוי המחלה) נמצאת בעיקר אצל ילדים במדינות אפריקה, לעתים רחוקות מאוד באמריקה, ואף לעתים רחוקות יותר באירופה (ואז רק על רקע איידס). גידול בלסת עם נזק לבלוטות הלימפה, לכליות ולאיברים אחרים נמצא אצל ילדים בגילאי 3-8 שנים.

סרטן האף והלוע, חלק ניכר מלימפומות אחרות, לויקופלקיה שעירה של הפה - כל אלה הם ביטויים של EBV על רקע חסינות מופחתת מאוד, המתרחשת עם זיהום HIV ושלב מאוחר יותר של איידס.

חוסר חיסוני מולד ותוספת של נגיף אפשטיין-בר הן תערובת מסוכנת שיכולה להוביל להתפתחות תסמונת פרוליפרטיבית אצל ילד. במקרה זה, עלייה במספר לימפוציטים מסוג B מובילה להופעת גרגירים באיברים רבים, מה שמונע מהם לתפקד כרגיל. זוהי מחלה עם שיעור תמותה גבוה, אך היא אינה מתפתחת על רקע חסינות תקינה.

ניתן לומר שבילדות, נגיף אפשטיין-בר מסוכן בעיקר במקרים של חוסר חיסוני עקב התפתחות סיבוכים שונים. ברוב המקרים, הכל מוגבל למונונוקליוזה זיהומית. ולמרות שזה לא דורש טיפול מיוחד, רופאים עדיין מעדיפים לקבוע את אופי הפתוגן, שעבורו הילד נקבע בדיקת דם כללית, אימונו-אסאי אנזים ו-PCR.

מאחר שבילדות מתרחשת בעיקר זיהום ראשוני, בהחלט ניתן להגביל את עצמך רק לספירת דם מלאה ו-PCR, שהם די אינפורמטיביים כאשר המחלה מתגלה לראשונה.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

ביצועים רגילים

תוצאות ניתוח ה-PCR מעובדות באמצעות אלקטרופורזה או באמצעות "פריימרים" מסומנים. במקרה האחרון, מספיק פשוט להוסיף ריאגנט (כרומוגן) ולקבוע לפי צבע האם יש ויריונים בדגימה. תוצאה חיובית באלקטרופורזה מסומנת כאשר מתגלים גדילי DNA באורכים שונים בדגימה הנחקרת.

במהלך תקופת הדגירה של המחלה ונשיאת הנגיף ללא תסמינים, בדיקת PCR תיתן תוצאה שלילית, כמו גם במקרה של היעדר מוחלט של הנגיף בגוף. בתחילת התפתחות הזיהום הראשוני ובשלביו המוקדמים, בדיקת PCR בזמן אמת יכולה לתת תוצאות חיוביות ושליליות כאחד, שאינן מבהירות את המצב בשום צורה.

עם זאת, בעיצומה של המחלה (שלב אקוטי), במהלך הכרוני שלה או בהפעלה מחדש של הנגיף (החמרה) ובמקרה של צורות לא טיפוסיות, הניתוח יהיה חיובי. אם אדם חולה זמן רב והנגיף בגופו נמצא במצב לא פעיל, ניתוח ה-PCR ייתן תוצאה שלילית, כלומר ביצוע ניתוח זה בתקופה זו אינו מתאים גם כן, כמו גם בשלבים מוקדמים מדי של המחלה.

יש לומר כי תוצאות מדויקות של סוג זה של מחקר מעבדה אפשריות רק במקרה של זיהום ראשוני ובהיעדר וירונים של וירוסים אחרים.

כעת, בנוגע לבדיקת אימונו-אנזים לנגיף אפשטיין-בר. יש לה אותן דרישות. נוכחות של נגיף הרפס מסוג 5 או 6, טוקסופלזמוזיס וזיהום HIV בגוף יכולים לעוות את התוצאה לא פחות מאשר גישה רשלנית לניתוח או איכות ירודה של הריאגנטים המשמשים. במקרה זה, ייתכן שיידרשו מחקרים נוספים, תוך התחשבות בפתוגנים אפשריים.

תוצאות בדיקה תקינות, המעידות על היעדר הנגיף בגוף, נחשבות לתוצאה שלילית עבור כל 4 הבדיקות: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA ו-IgG EBNA. כן, כל בדיקה מבוצעת בנפרד, מכיוון שאנטיגנים מופיעים בתקופות שונות של המחלה. לעיתים ניתן לרשום רק בדיקות בודדות, אך ברוב המקרים יש לבצע את כל 4 הבדיקות, אך בתקופות שונות של המחלה.

לדוגמה, במהלך תקופת הדגירה של המחלה, כמו גם בהיעדר זיהום, אף אחד מ-4 סוגי הנוגדנים לא מתגלה בדם. תוצאה כזו אינה יכולה להיחשב מספקת, משום שהיא אינה מאפשרת להבדיל בין אדם שחלה בפעם הראשונה לבין אדם בריא.

בתחילת התפתחות המחלה הראשונית, מופיעים בדם רק נוגדנים מסוג IgM VCA. בשלבים המוקדמים של המחלה מצטרפים אליהם נוגדנים מסוג IgG VCA.

השלב האקוטי של הזיהום הראשוני מתרחש עם היווצרות של שלושה סוגי נוגדנים: IgG VCA, IgM VCA ו-IgG EA, כאשר המספר הגדול ביותר של נוגדני IgG לאנטיגן הקפסיד זוהה. אותו הרכב נוגדנים נשמר במשך שישה חודשים לאחר השלב האקוטי של המחלה, אך כמות ה-IgM VCA יורדת בהדרגה לאפס.

שישה חודשים לאחר המחלה, נוגדנים מסוג IgG EBNA מופיעים בדם, בעוד שאימונוגלובולינים מסוג IgG EA הולכים ופוחתים, ונוגדני IgM VCA נעדרים לחלוטין.

במקרים כרוניים של המחלה או הפעלה מחדש של הנגיף, ייתכנו אינדיקטורים שונים. לרוב, כל 4 סוגי הנוגדנים נמצאים בדם. אך ייתכן בהחלט שהאימונוגלובולינים IgM VCA ו-IgG EBNA אינם מזוהים.

סיבוך של זיהום ויראלי על ידי תהליכי גידול מתרחש בהיעדר נוגדנים מסוג IgM VCA, ואימונוגלובולינים מסוג IgG EBNA אינם מזוהים בכל המקרים.

אבל אימונו-אסאי אנזימטי קובע לא רק את נוכחותם של נוגדנים מסוימים, אלא גם את ריכוזם, מה שמאפשר לנו לשפוט את שלב הפתולוגיה ואת השלכותיה האפשריות בדיוק רב יותר. אין צורך לדבר כאן על נתונים ספציפיים. אחרי הכל, כל מעבדה מבצעת את הניתוח באחת הדרכים האפשריות, תוך שימוש בריאגנטים שונים, כך שתוצאות הניתוח של מעבדות שונות עשויות להיות שונות בפורמט דיגיטלי.

על המטופל לקבל טופס המציין את ערכי הסף (ערכי הייחוס). אם התוצאה נמוכה מהסף, היא נחשבת לאינדיקטור תקין (שלילי). אם המספר שנקבע גבוה מערך הייחוס, הכל מצביע על תוצאה חיובית, מה שאומר שהנגיף חי בגוף. ערך הערך שנקבע מציין את שלב המחלה ואת מידת ההתיישבות בגוף עם ויריוני EBV, כלומר את חומרת הפתולוגיה.

אם בדיקת ELISA שלילית, זה רק אומר שהאדם לא היה במגע עם EBV בעבר. אבל אי אפשר לומר בוודאות אם הנגיף קיים כעת בגוף. תוצאה שלילית יכולה להיגרם עקב דגירה של הפתוגן בגוף ונשיאה אסימפטומטית של הנגיף. לפעמים, כדי לוודא שהגוף אינו מאוכלס על ידי הנגיף, יש צורך לבצע סדרה שנייה של בדיקות לאחר זמן מה.

אם תוצאת בדיקת ה-ELISA של נגיף אפשטיין-בר חורגת רק במעט מערכי הייחוס, התוצאה נחשבת מפוקפקת. הסיבה היא לרוב השלב המוקדם של המחלה או נוכחות של ויריונים של נגיף אחר בגוף. במקרה זה, לאחר שבועיים, מומלץ לבצע בדיקה חוזרת ל-EBV ואולי גם לפתוגנים אחרים.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

באשר לשאלה כמה זמן לוקח לבצע בדיקת וירוס אפשטיין-בר ומתי ניתן לצפות לתוצאות, אין קשיים מיוחדים שניתן לצפות להם. במעבדה רצינית ומאובזרת היטב, תצטרכו להמתין לא יותר מיומיים לאחר הגשת החומר הביולוגי. במצבים הדורשים ניתוח דחוף, ניתן לקבל את התשובה גם לאחר מספר שעות.

יש לבצע את בדיקת נגיף אפשטיין-בר במעבדה מהימנה, שבה יש גם ריאגנטים איכותיים וגם מומחים מוסמכים. אחרי הכל, הבדיקה עולה כסף (וסכום לא קטן, בדיקה לסוג אחד של נוגדן עולה כ-150-170 גריבנה), ואני לא הייתי רוצה לקבל תוצאה שגויה, ואז אולי לפנות שוב, אבל למעבדה אחרת, לבדיקה חוזרת.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]