המומחה הרפואי של המאמר
פרסומים חדשים
בדיקת דם עבור וירוס אפשטיין- Barr עבור נוגדנים PCR: איך לקחת את זה, את הנורמה
סקירה אחרונה: 23.04.2024
כל תוכן iLive נבדק מבחינה רפואית או נבדק למעשה כדי להבטיח דיוק עובדתי רב ככל האפשר.
יש לנו קווים מנחים קפדניים המקור רק קישור לאתרים מדיה מכובד, מוסדות מחקר אקדמי, בכל עת אפשרי, עמיתים מבחינה רפואית מחקרים. שים לב שהמספרים בסוגריים ([1], [2] וכו ') הם קישורים הניתנים ללחיצה למחקרים אלה.
אם אתה סבור שתוכן כלשהו שלנו אינו מדויק, לא עדכני או מפוקפק אחרת, בחר אותו ולחץ על Ctrl + Enter.
על ידי הרפס אנו רגילים להבין שלפוחיות מכאיבות לא אסתטיות על הפנים באזור השפתיים, אשר לאחר מכן טופס קרום חום. למרבה הצער, זה רק אחד הפנים של וירוס הרפס, אשר אדם יכול להיפגש ב 8 hypostases. מה שאנחנו מכנים הרפס הוא וירוס מסוג 1 או וירוס הרפס סימפלקס. הסוג השני של הנגיף גורם להרפס גניטלי, הסוג השלישי - "אבעבועות רוח" ורעפים, המונוקלאוזיס המדבק 4 - ומספר פתולוגיות מסוכנות אחרות, וכו '. רשימה זו יכולה להימשך, אבל אנחנו נתמקד בסוג הרפס 4 מסוג וירוס, אשר נקרא אחרת וירוס אפשטיין-בר. בואו ננסה להבין מהו וירוס הרפס מסוג 4, מה זה מסוכן, מתי ולמה הם עורכים ניתוח עבור וירוס אפשטיין-בר ומה אומרים תוצאות המעבדה.
מהו הנגיף הרפס מסוג 4?
סוג הרפסווירוס 4, כאחת הזנים של זיהום herpesvirus, תוארה לפני 53 שנה על ידי ויירולוג מיכאל מייקל אפשטיין. בעבודה על הפרוייקט סייעה הפרופסור לסטודנט שלו, איבון בר. זה לאנשים האלה כי הנגיף חייב את שמו. עם זאת, כבר 15 שנים לאחר היכרות עם הנגיף, השם המדעי שלו השתנה האדם herpesvirus 4, ו לפני שנה את הנגיף נקרא וירוס גמא האנושי סוג 4.
אבל מהו וירוס אפשטיין-בר? כמו כל וירוס אחר, ה- virion (שעון הנגיף) מסוג הרפס וירוס מסוג 4 מורכב מחומר גנטי (במקרה זה דנ"א כפול תקועים) ומעטפת החלבון (קפסיד). יתר על כן, הנגיף מוקף קרום המסייע לו בקלות להתאים את התא המארח.
כל וירוס הוא צורה לא סלולרית שהיא גורם זיהום ואינה יכולה להתפתח ולהתרבות מחוץ לתאי אורגניזם חי. בית הגידול המועדף של סוג herpesvirus 4 הוא תאים אפיתל של nasopharynx. הם גם לא בוז ליקוציטטים, ומעדיפים אחד הזנים שלהם, קרא B- לימפוציטים. זה תאי B כי באופן פעיל להשתתף במערכת החיסונית של הגוף. במגע עם האנטיגן, אשר במקרה שלנו הוא וירוס herpesvirus מסוג 4 (ליתר דיוק, האנטיגנים שלו), B- לימפוציטים לייצר נוגדנים (חלבונים, immunoglobulins). הם אותם ניתן לזהות בדם של המטופל על ידי ניתוח של Epstein-Barr וירוס (VEB).
הסוג הרביעי של הרפס וירוס מבודד 4 אנטיגנים, אשר מופיעים רק ברצף מסוים:
- EA הוא אנטיגן מוקדם שמופיע בשלב הראשוני של המחלה, כאשר חלקיקים נגיפיים נמצאים בשלב הסינתזה (דלקת חריפה ראשונית או הפעלה מחדש של הווירוס האורב עם חסינות מופחתת)
- VCA הוא אנטיגן capsid, אשר הכלול במעיל חלבון וגם שייך המוקדמות, כי מבחינה קלינית המחלה בתקופה זו לא יכול אפילו להתבטא,
- MA - אנטיגן ממברנה, מופיע כאשר virion כבר נוצר,
- EBNA - אנטיגן גרעיני (פוליפפטיד או גרעיני) אנטיגן מתייחס למספר אנטיגנים מאוחר, נוגדנים אשר ניתן לזהות אפילו כמה חודשים לאחר המחלה להישאר בדם לאורך כל החיים.
סוג ההרפס 4 הוא מאוד מסובך. מאז הנגיף אינו פעיל מחוץ אורגניזם חי, זה יכול רק להיות נגוע מן האדם שהוא המקור של הזיהום. וזה לא חייב להיות כי כל הסימפטומים של המחלה הם מצאו, הזיהום יכול להיות טופס נמחק, מוסווה כעייפות הרגילה. לדוגמה, התסמונת של עייפות כרונית קשורה ברוב המקרים עם וירוס אפשטיין-בר.
Virions הפרט ניתן למצוא את הדם, רוק, זרע, הפרשות בנרתיק, רקמות של איברים שונים. חלקיקי הנגיף, יחד עם הרוק והדם, לא יכולים לעקוף את החפצים שסביבנו, שם הם יהיו במצב לא פעיל, עד שיגיעו איכשהו לגוף האנושי. ברוב המכריע של המקרים, זיהום מתרחשת על ידי מוטס או קשר (באמצעות נשיקות) דרך. אבל ניתן גם להעביר את התולעת תוך רחמית של הנגיף מאם לעובר, זיהום בהליך של עירוי דם (אם הדם של התורם מכיל virions של וירוסים), במהלך יחסי מין.
לאחר הזנת הגוף השתלת לתוך מבנים הסלולר, זה יכול לקחת 5 עד 50 ימים לפני המחלה מזכירה את עצמה. אבל זה אולי לא זוכר, דולף בצורה נסתרת, כפי שקורה ברוב המקרים.
כן, על פי מחקרים, כ -90% מהמבוגרים לפחות פעם אחת בחייהם סבלו מזיהום הרפטית הקשורה ב- VEB. רוב האנשים אפילו לא יודעים את זה, כי הגוף שלהם היה מסוגל להתמודד עם התקפת הנגיף. אבל זה לא תמיד קורה.
כיצד מתגלה וירוס אפשטיין-בר?
לרוב, רופאים צריכים להתמודד בתרגול שלהם עם הסוגים הבאים של הקורבן של זיהום herpesviral מסוג 4:
- צורה כרונית (מתרחשת לאחר השלב החריף של המחלה, יש כמה תסמינים נפוצים של בריאות לקויה),
- צורה סמויה או סמויה (ללא תסמינים, אך הווירוס נשאר פעיל ומשוחרר לסביבה)
- הצורה האיטית (מתרחשת בתדירות נמוכה יותר, הסימפטומים מתרחשים אחד בכל פעם במשך תקופה ארוכה, מסתיימת עם מותו של המטופל).
בפעם הראשונה אדם נגוע בנגיף אפשטיין-בר בעיקר בילדות ובגיל ההתבגרות. שיא השיא נופל על גיל 14 עד 18 שנים.
זיהום ויראלי ראשי יש 3 צורות שונות:
- ללא תסמינים קליניים),
- הנשימה (סימפטומים של דלקת בדרכי הנשימה: חום, הפרשות באף, חולשה כללית וכו ')
- מונונוקליוזה זיהומית עם שלשה של הסימפטומים העיקריים: חום גבוה, סימנים של כאב גרון עם קרום צהבהב על השקדים, עלייה באיברים כגון הכבד והטחול; עם עלייה ברמת הלוקוציטים ועלייה בבלוטות הלימפה.
ישנן מספר אפשרויות לצאת מן השלב החריף של המחלה:
- התאוששות מלאה,
- הסימפטומים של המחלה נעלמים, אבל הנגיף נשאר בגוף ומתפתח, אם כי זה לא מוביל לשינויים ניכרים בתאים (נושאת וירוס),
- אין תסמינים של המחלה, הנגיף אינו עוזב את הגוף, אלא גם מראה פעילות מיוחדת (צורה סמויה),
- הפעלה מחדש (הפעלה מחדש) של הנגיף מהצורה הסמויה,
- דלקת כרונית (עם הישנות המחלה, צורה פעילה כרונית, כללית עם נגעים של איברים ומערכות הגוף).
תוצאה של שהייה ממושכת של וירוס באורגניזם יכולה להיות:
- צורה כרונית של מונונוקליוזה זיהומית.
- Gematofagotsitarny תסמונת : חום יציב, רכיבי דם מופחתים (קרישה מוגברת), כבד מוגדל וטחול, דימום רירי, צהבת (עקב הפרעות בכבד), הגדלת בלוטות לימפה, תסמינים נוירולוגיים.
- טופס מחוק עם התפתחות של חיסוני משנית : היפרתרמיה במשך זמן רב, חולשה כללית, עלייה וכאב של בלוטות לימפה, כאבי שרירים ומפרקים, מחלות זיהומיות תכופות.
- התפתחות של פתולוגיות אוטואימוניות בצורת זאבת אריתמטוס, דלקת מפרקים שגרונית וכדומה.
- תופעות של תסמונת עייפות כרונית עם הידרדרות הרווחה הכללית ויכולת עבודה.
- צורה כללית של דלקת כרונית עם CNS, לב שריר הלב, כליות, כבד, מחלת ריאות.
- התפתחות סרטן (לוקמיה לימפתי ולימפומה), שבה יש עלייה פתולוגית במספר התאים של מערכת הלימפה. סוג ההרפס 4 אינו הורס את תאי המוביל, אלא מכריח אותם להתרבות באופן פעיל, וכתוצאה מכך מזוהים גידולים חדשים מרקמת הלימפה.
כפי שאתה יכול לראות, וירוס אפשטיין-בר אינו מזיק כפי שהוא נראה במבט ראשון, ולכן, זה לא שווה את זה כדי להיות מטופל בקלות. במיוחד מאז הרפס מסוג 4 מאופיין על ידי פרקים תכופים של הנשיאה נושאת צורה נסתרת, שלא לדבר על צורות שונות של זיהום כרוני, כאשר אדם נשאר מקור ההדבקה, מבלי לדעת את זה.
קביעת נוכחות של סוכן זיהומיות בגוף במקרה זה אפשרי רק בעזרת ניתוח מיוחד של וירוס אפשטיין-בר, חומר ביולוגי אשר הדם משמש בדרך כלל.
אינדיקציות להליך ניתוח עבור וירוס אפשטיין-בר
מאז זיהום herpesvirus מסוג 4 הוא לפעמים לא קל לזהות, חשד זה לא תמיד נופל. אבל יש סימנים מסוימים בהם הרופא יכול לחשוד בנוכחות של הנגיף בגוף:
- מערכת חיסון מוחלשת קשות (בקבוצת הסיכון יש חולים עם HIV ואיידס, חולים לאחר השתלות איברים או כימותרפיה)
- עלייה בבלוטות הלימפה באזור הסנטר והעורית של הראש וכאבותם, במיוחד אם זה נצפה לאחר עירוי דם או השתלת איברים מתורם.
- (ARVI), המתרחשת על רקע של טמפרטורות גבוהות מאוד (38-40 מעלות),
- את הופעת הסימנים של mononucleosis זיהומיות, אשר מתרחשת לרוב תחת השפעתו של וירוס אפשטיין-בר.
גם אם הסימנים לעיל אינם קיימים אצל אדם, החשד של מומחה עלול לגרום לתוצאות מסוימות של בדיקות קונבנציונליות (ניתוח כללי וביוכימיה של הדם), וכן מחקרים על מצב החיסון.
בדיקת דם כללית עבור וירוס אפשטיין-בר יכולה להראות:
- גידול במספר הלימפוציטים,
- המוגלובין נמוך, המצביע על ירידה ברמת אריתרוציטים,
- מוגברת קרישת הדם עקב מספר גדול של טסיות דם,
- את המראה של virotsitov (לימפוציטים לא טיפוסיות, דומה במבנה למונוציטים).
בדיקת דם ביוכימית, המספקת מידע על מצב האיברים הפנימיים, תציג שינויים בתפקוד הכבד והטחול.
Immunoassay עם EBV עלול להראות שינויים במספר לימפוציטים ספציפיים, הפער במספר כיתות אימונוגלובולינים שונים (disimmunoglobulinemiya), מחסור אימונוגלובולינים של G, אשר מראה את החולשה של המערכת החיסונית וחוסר יכולתה לעמוד בהסתערות של הנגיף.
תוצאות כאלה של ניתוחים לא ספציפיים יכולים להזהיר את הרופאים, אבל לומר בדיוק מה הם מתמודדים עדיין לא אפשרי. הכל יישאר בשלב ההנחות והאבחנה הראשונית. ברוב המקרים, הרופאים חושדים בצורה סמויה של מונונוקליוזה זיהומית, אם כי פתולוגיות ויראליות אחרות (שפעת, הפטיטיס, וכו ') עשויות להתבטא גם באותו אופן.
בהתייחסות לשכיחות הגבוהה של דלקת כבד מסוג 4 והאפשרות להעברתה מאם לילד, הניתוח עבור וירוס אפשטיין-בר יהיה שימושי בתכנון הריון. אם האם כבר היתה דלקת בעבר, הגוף שלה פיתחה נוגדנים לה. הדבקה חוזרת נשללת בדרך כלל בשל היווצרות חסינות מתמשכת, ואם כן, לא יהיו לה השלכות אפשריות במפגש הראשון עם הנגיף. החסינות תעכב את פעילות הנגיף במשך כל החיים, למרות שהווירוס עצמו יישאר בתוך הגוף, כמו כל אחד מהרפויים.
אם האמא העתידית לקחה את נגיף הרפס במהלך ההריון, היא כרוכה בפלות ובלידה מוקדמת, או שהווירוס ישפיע לרעה על התפתחות הרחם של התינוק.
הניתוח על VEB יכול להתמנות על ידי האונקולוג בחשד ללימפומה של Burket או לאבחון של תהליכים סרטניים אצל אנשים עם HIV. המטפל יכול להשתמש בניתוח כזה באבחון של זיהומים הרפטיים (אבחנה דיפרנציאלית כדי להבהיר את סוג הנגיף). לפעמים הניתוח מתבצע גם כדי להעריך את היעילות של הטיפול.
הכנה
בהתאם לסוג של מחקר הביולוגי על זה יכול להיות דם, רוק, שתן, כיח, מדגם מי שפיר, גירוד, אשר נלקח מצוואר הרחם או השופכה, הנוזל השדרתי (CSF). לרוב, רופאים לפנות המחקר של הדם, אשר נחשב אינפורמטיבי ביותר.
ברור כי כמה נקודות עלול להשפיע לרעה על איכות וכמות של ביולוגי, כך יום לפני זה הכרחי כדי לדבוק בכללים מסוימים:
- כל בדיקות (במיוחד בדיקות דם) צריך לקחת בבוקר על קיבה ריקה. הארוחה האחרונה צריכה להיות לא יאוחר מ 12 שעות לפני נטילת דם, אז עדיף לשתות מים לארוחת ערב.
- דם ורידי נחשב החומר המתאים ביותר לניתוח של וירוס אפשטיין בר, ו -15 דקות מנוחה מומלץ תמיד לפני מתן דם מן הווריד אם אדם הגיע רק למעבדה,
- כדי לקחת דם ללא כל תוצאה ואת תוצאת הניתוח היה אמין, לא מומלץ לבצע עבודה גופנית פעילה לשחק ספורט, לשתות אלכוהול ועשן במשך 12 שעות לפני ההליך.
- תוצאות הבדיקות עשויות להשפיע על צריכת התרופות. מאת תרופות צריך להיות נטוש לפחות 2 ימים לפני הניתוח. אם זה לא יכול להיעשות, יש צורך להודיע על האחות במעבדה על ההכנות נלקח.
- בהריון לפני מחקר על VEB ניתוח על toxoplasmosis מתבצעת כדי להוציא תגובה חיובית כוזבת.
- אם בדיקת הדם של וירוס אפשטיין-בר נעשית לילד מתחת לגיל 5, חצי שעה לפני המניפולציה, יש לתת לתינוק כמות גדולה של מים רותחים במנות קטנות יחסית.
אם חומר ביולוגי נוסף נלקח לניתוח, הרופא צריך לציין מראש את כל הניואנסים של הכנה לניתוח, בהתאם החומר המשמש.
טֶכנִיקָה ניתוח עבור וירוס אפשטיין-בר
תפקיד חשוב באבחון של הרפס מסוג 4 ו mononucleosis זיהומיות ניתנת לרופאים על ידי מבחני ספציפיים המסייעים לזהות את ה- DNA של הנגיף או נוגדנים ייחודיים ביולוגי של המטופל. הסוגים העיקריים של מחקרי מעבדה המשמשים לזיהוי וירוס אפשטיין-בר בגוף האדם כוללים אימונואיסאי (ELISA) ו- PRC. הבה נבחן ביתר פירוט את המהות של שתי השיטות ואת הייחודיות של התנהגותן.
ניתוח Immunoenzyme על VEB
ELISA הוא מחקר (ניתוח) של הדם הוורידי של חולים על נוגדנים לנגיף אפשטיין-בר. כתוצאה מאבחנה בדם של חולים עם VEB, אימונוגלובולינים מסוג Ig או IgM (סה"כ 5 מינים) מזוהים לאחד משלושת האנטיגנים של הנגיף (מוקדם, קפסיד או גרעיני).
הניתוח מתבצע במעבדה החיסונית, שם החולה לוקח בערך 10 מ"ל של דם מן הווריד. לאחר מכן, חומר ביולוגי נשאר בטמפרטורת החדר במשך רבע שעה, שבמהלכו הדם מתקפל. קריש מופרדים היטב מן החלק הנוזלי. הנוזל הוא centrifuged ו סרום נקי (סרום) של דם מתקבל. זה שלה כי הוא נתון למחקר נוסף.
הרעיון של השיטה התעורר על בסיס נתונים שבגופנו נוצרים נוגדנים ספציפיים לכל אחד מסוגי הנגיפים והחיידקים החודרים לגוף מבחוץ. האורגניזם מכיר את הזר בהם ומשמיד אותם בעזרת נוגדנים ייחודיים שדבקים היטב באנטיגן.
המהות של ניתוח ELISA מבוססת בדיוק על תגובה זו. נוגדנים עם תוויות המצורפת אליהם משולבים עם אנטיגנים. התווית מוחלת על חומר שמגיב עם אנזים מיוחד כדי לשנות את צבע המדגם. ככל "שרשראות" כאלה, יותר אינטנסיבי הצבע של ביו.
ניתוח אימונזינזים יכול להתבצע בשלוש דרכים:
- ישיר IFA. נוזל הבדיקה ממוקם בארות והשאיר במשך כחצי שעה, כך אנטיגנים יכול לצרף את הקירות של הבאר. כדי antigens sorbed הוא הוסיף נוזל עם נוגדנים שכותרתו. לאחר הזמן הנדרש (מחצי שעה עד 5 שעות), כאשר נוגדנים מזוהים ומגע עם אנטיגנים, הנוזל מתרוקן, הבארות נשטפים בעדינות והאנזים מתווסף אליו. לפי שיטת הצבע, נקבע ריכוז הנגיף ביחידת דם.
- עקיפה EIA. בשיטה זו, את הסרום של הדם ואת הנוגדנים שכותרתו מתווספים אנטיגנים צרב על פני הבארות. כתוצאה מכך, 2 סוגים של רצועות מתקבלים, שחלקם מתקבלים שכותרתו. התוצאה תלויה בריכוז של אנטיגנים במדגם הבדיקה. נוגדנים יותר ללא תווית, פחות תרכובות שכותרתו עם האנזים.
יתר על כן, מגיב מיוחד מתווסף הרכב שטף, לפיה הפעילות האנזימטית של נוגדנים אנטיגן נוגדנים נקבע.
- "סנדוויץ '". זה שונה מן השיטה העקיפה כי אנטיגנים בתחילה, ולא נוגדנים, הם צפופים על פני השטח. עבורם, נוסף פתרון המכיל את האנטיגנים הנלמדים. לאחר שטיפת המוביל, נוגדנים עם תוויות אנזימטיות מתווספים. עודף של נוגדנים מוסר שוב חומר צבעוני מתקבל באמצעות מי חמצן, אשר נלמד על ידי השיטה ספקטרומטריים.
סוג זה של ניתוח מאפשר לא רק לזהות נוגדנים ספציפיים ולקבוע את הריכוז של אנטיגנים, אלא גם כדי להבהיר את שלב המחלה. העניין הוא כי אנטיגנים שונים של הנגיף של Anstein-Barr וירוס מופיעים בשלבים שונים של זיהום הרפטית, ולכן נוגדנים להם מיוצרים בתקופה מסוימת של המחלה.
לפיכך, נוגדן IgG לאנטיגן המוקדם (IgG EA) מופיע בדם 1-2 שבועות לאחר ההדבקה, כאשר המחלה נמצאת בשלב החריף או בשלב של הפעלה מחדש של הנגיף. נעלמים immunoglobulins מסוג זה 3-6 חודשים. במהלך הכרוני של זיהום ויראלי, נוגדנים כאלה הם רבים במיוחד, ובצורה לא טיפוסית הם נעדרים לחלוטין.
נוגדן IgG לאנטיגן הקפסיד (IgG VCA) מופיע מוקדם גם במהלך 4 השבועות הראשונים של המחלה, אך רובם נקבעים על ידי החודש השני של ההדבקה. בשלב החריף, הם נמצאים ברוב החולים, אך הם אינם מופיעים אצל ילדים. במהלך הכרוני של המחלה, במיוחד בתקופות של הפעלה מחדש של הנגיף, כמות IgG VCA גבוהה במיוחד. נוגדנים אלה אצל אדם בדם נשארים לעד, כמו הווירוס עצמו, המעיד על חסינות נוצרית בפני הגורם המדבק.
נוגדנים של IgM לאנטיגן הקפסיד (IgM VCA) עשויים להופיע עוד לפני שהסימנים הראשונים של המחלה מופיעים. הריכוז שלהם (titers) הוא גדול במיוחד ב 6 שבועות הראשונים של המחלה. סוג זה של נוגדנים אופייניים לזיהום חריף ולהפעלה מחדש של כרוני. IgM VCA נעלם לאחר 1-6 חודשים.
IgG נוגדנים לגן גרעיני (IgG EBNA) עשוי להצביע על כך שאדם היה בעבר נתקל ישירות זיהום herpetic. בשלב החריף של המחלה, הם נדירים ביותר, בדרך כלל מופיעים בתקופת ההחלמה (3-10 חודשים). בדם שלהם, הם יכולים להימצא כמה שנים לאחר ההדבקה.
זיהוי של אנטיגנים בודדים אינו נותן תמונה מלאה של המחלה, ולכן, בדיקות עבור נוגדנים שונים צריך להתבצע בשילוב. לדוגמה, אם רק IgM VCA קיים ו- IgG EBNA אינו מזוהה, זהו זיהום ראשוני.
למרבה הצער, כדי לזהות את זיהום הרפטית העיקרי או פתולוגיה מולדת של אנזים immunoassay הוא לעתים קרובות לא מספיק. במקרה האחרון, לא ניתן לזהות נוגדנים כלל. כמבחן המאשר את המחלה הראשית, מחקר מולקולרי של דם או חומר ביולוגי אחר על וירוס אפשטיין-בר משמש.
ניתוח PRC עבור וירוס אפשטיין-בר
ניתוח זה מתבצע בשלב של זיהום ראשוני חריף, אחרת התוצאה שלו תהיה שגויה.
המהות של שיטת PRC (תגובת שרשרת ממדי) מסתכמת בעובדה שלכל סוכן זיהום יש מערך גנים משלו במולקולת דנ"א. ה- DNA של הפתוגן נכלל בכמויות קטנות שנלקחו לחקר החומר הביולוגי (לוירוסים עצמם יש ממדים מיקרוסקופיים), ולכן קשה מאוד להעריך את המצב. אבל אם אתה מבצע תגובה ספציפית, כמות החומר הגנטי יגדל באופן משמעותי, אשר ייתן את ההזדמנות שם הסוכן סיבתי לפי שם.
בעזרת מכשירים חד פעמיים לקחת חומר למחקר מולקולרי, אשר ממוקם במנגנון מיוחד לניתוח. המכשיר הוא תרמוסטט עם תוכנית מיוחדת - cycler תרמי או מגבר. במנגנון, מחזור מלא של PRC (כ 2-3 דקות) הוא גלילה כמה עשרות פעמים, אשר יש 3 שלבים:
- Denaturation (בטמפרטורה של 95 מעלות, גדילי ה- DNA להתנתק).
- חישול (בטמפרטורה של 75 מעלות, מוכנות במיוחד "זרעים" עבור VEB מוכנסים לתוך חומר הבדיקה, אשר מחוברים DNA של הנגיף).
- התארכות או שכפול של חומר גנטי (אנזים מיוחד מחובר לזרע בטמפרטורה של 72 מעלות, אשר יוצר מחדש שרשרת DNA חדשה, ובכך מגדיל את כמות החומר הגנטי בחצי).
אם מחזור שלם של התגובה poly-dimensional מנוהל 50 פעמים, כמות החומר יגדל 100 פעמים. אז, זה יהיה הרבה יותר קל לזהות את הפתוגן.
ניתוח של וירוס אפשטיין-בר אצל ילד
כפי שאנו כבר יודעים, וירוס אפשטיין-בר יכול לגרום למחלות רבות. ברגע שהוא נמצא בגוף האדם, הוא נשאר תושב קבע שלו, ורק את העבודה מתואמת היטב של המערכת החיסונית לא מאפשר לו לטפוא באופן פעיל בתוך התאים.
כמעט 95% מהאוכלוסייה הבוגרת של כדור הארץ חי עם VEB בפנים, ורובם נפגשו עם הנגיף מאז ילדות מוקדמת. עד כמה הוא ירש מאמו, ואחרים קבלו את הווירוס מההורים ובני משפחותיהם ממהרות הילד בנשיקות, או על ידי טיפות בגן או בבית הספר (מחלות זיהומיות יש בדרך כלל נרכשות "אוניברסלית" מידה).
ילדים קטנים בכלל נוטים לכל למשוך את הפה, ומספר גדול יותר של virions נמצא הרוק. ואם בגן אחד וצעצוע אחד הוא ליקק על ידי כמה ילדים, בעוד המחנכים עסוקים בענייניהם, אין זה מפתיע כי הנגיף כל כך מתפשט באופן פעיל בקבוצות גדולות של ילדים.
VEB יכול בקלות להיקרא מחלה של ילדים ונוער, כי בגיל ההתבגרות, כבר מחצית מהילדים יש וירוס בגוף (ועל ידי 30 שנים כ -90% מהמבוגרים). ילדים חולים בתקופות גיל שונות בדרכם שלהם. עד שנה, עד שהילד מתקשר באופן פעיל עם אנשים, ההסתברות לחלות ממנו אינה גבוהה. הילד בן יותר משנה, גם אם הוא לא הלך לגן, הופך להיות חברותי יותר, משחק עם עמיתים ברחוב, מבצע קניות קניות עם אמא שלו, וכו ', ואת ההסתברות ללכוד את הנגיף הופך הרבה יותר גבוה.
אבל זה לא תירוץ לנעול את הילד ב 4 קירות. בגיל 1-3 שנים המחלה ברוב המכריע של המקרים מתרחשת ללא כל סימפטומים, אלא כי עם עלייה קלה בטמפרטורה דלקת קלה, מזכירה הצטננות. מתברר כי קודם לכן ילד מקבל היכרות עם וירוס, כך קל יותר להכיר את זה.
זה לא טוב אם הילד חולה ללא הופעת נוגדנים בדם IgG VCA, אשר עשוי להצביע חסין כי לנגיף לא נוצר, ועל מחדש האפשרי של הנגיף בהקדם את המערכת החיסונית נותנת את החסר. הסיבה היא, ככל הנראה, את חוסר השלמות של המערכת החיסונית של ילדים צעירים, אשר נמצאת בשלב מכונן במשך מספר שנים.
חיי בית הספר מעניקים יותר תנאים מוקדמים למחלה, במיוחד בתקופת ההתבגרות, כאשר צעירים מתנסים בנשיקות באופן אקטיבי. אבל אצל ילדים מעל גיל 3 שנים, המחלה נוטה פחות לקבל טיפול אסימפטומטי. ברוב המקרים, הרופאים מתמודדים עם מונונוקליוזה זיהומית עם סימפטומים אופייניים לה.
למרות העובדה כי הפתולוגיה יכולה להיות כמובן ארוך (כ 2 חודשים), זה לא כל כך מסוכן ואינו דורש שימוש בסמים רציניים. הרופאים רושמים תרופות אנטי דלקתיות ואנטי-ויראליות, אם מזוהמים זיהומים חיידקיים, הם מבקשים עזרה מאנטיביוטיקה. אגב, פניצילין במקרה זה לא מומלץ כי הם יכולים לעורר את המראה של פריחות בעור.
אל תחשוב שאם ילד או נער מקבל נגוע במונונוקליוזה מדבקת, אז וירוס אפשטיין-בר התיישב בגופו. למחלה יש פתוגנים פחות שכיחים, למשל, cytomegalovirus (וירוס הרפס מסוג 5). כדי להבין מה הרופאים עוסקים, הם רושמים ניתוח עבור וירוס אפשטיין-בר, ובמידת הצורך, בדיקות מעבדה אחרות.
זה נכון גם כי mononucleosis זיהומיות אינו הביטוי היחיד של VEB בילדות. ישנן מחלות אחרות הקשורות זה הפתוגן, אבל באזור שלנו הם נדירים.
אז לימפומה של Burkitt (במיוחד, VEB שלה נובע הגילוי שלה) נמצא בעיקר ילדים במדינות אפריקה, נדיר מאוד באמריקה, אפילו פחות באירופה (ורק נגד איידס). גידול הלסת עם נגעים של בלוטות הלימפה, הכליות ואיברים אחרים נמצא אצל ילדים בגילאי 3-8 שנים.
סרטן שלפוחית השתן, חלק משמעותי של לימפומות אחרות, לוקופלאקיה שעיר של הפה הם כל הביטויים של VEB על רקע חסינות מופחתת באופן משמעותי, אשר קורה עם הידבקות ב- HIV ושלב מאוחר יותר של איידס.
חוסר חיסונים מולד והיצמדות של וירוס אפשטיין-בר הוא תערובת מסוכנת שיכולה להוביל להתפתחות של תסמונת מתרבתת אצל ילד. במקרה זה, עלייה במספר לימפוציטים B מוביל למראה של גרגיר באיברים רבים, אשר מונע מהם לתפקד כרגיל. זוהי מחלה עם רמה גבוהה של תמותה, אבל על רקע של חסינות רגילה זה לא מתפתח.
אנו יכולים לומר כי בילדות, וירוס אפשטיין-בר הוא מסוכן בעיקר בחוסר חיסונים עקב התפתחות של סיבוכים שונים. ברוב המקרים, הכל מוגבל מונונוקלאוזיס זיהומיות. ואף על פי שהוא אינו זקוק לטיפול מיוחד, הרופאים מעדיפים לקבוע את טבעו של הסוכן הסיבתי של המחלה, שעבורו הילד מקבל בדיקת דם כללית, אימונואיס אנזימי ועדות ההתנגדות העממית.
מאז בילדות יש בעיקר זיהום ראשוני, זה בהחלט אפשרי להגביל את עצמנו רק OAK ו PRC, אשר אינפורמטיבי למדי המחלה שאובחנה לאחרונה.
ביצועים רגילים
עיבוד התוצאות של ניתוח PRC מתבצע על ידי אלקטרופורזה או עם השימוש של "פריימרים" שכותרתו. במקרה האחרון, זה מספיק כדי להוסיף את מגיב (כרומוגנים) ולקבוע לפי הצבע אם יש virions במדגם. תוצאה חיובית של אלקטרופורזה הוא אמר להיות כאשר גדילי דנ"א כי הם שונים באורך נמצאים במדגם.
בתקופת הדגירה של המחלה ומוביל הווירוס האסימפטומטי, ה- PRC ייתן תוצאה שלילית, כמו במקרה של חוסר מוחלט של הנגיף בגוף. בתחילת ההתפתחות של הזיהום הראשוני ובשלבים המוקדמים שלו, PRC בזמן אמת יכול לתת גם תוצאות חיוביות ושליליות, אשר בשום אופן לא מבהיר את המצב.
אבל בשיא המחלה (שלב חריף), עם מסלול כרוני או הפעלה מחדש של הנגיף (החמרה) ובמקרה של צורות לא טיפוסיות, הניתוח יהיה חיובי. אם אדם חולה במשך זמן רב והווירוס בגופו נמצא במצב לא פעיל, ניתוח PRC ייתן תוצאה שלילית, כלומר. התנהגותו של ניתוח זה במהלך תקופה זו היא גם בלתי נמנעת, כמו בשלב מוקדם מדי של המחלה.
יש לומר כי התוצאות המדויקות של סוג זה של בדיקות מעבדה אפשריים רק עם זיהום ראשוני והיעדר virions של וירוסים אחרים.
עכשיו, לגבי החיסון האינסופי של וירוס אפשטיין-בר. יש לו אותן דרישות. נוכחות של 5 או 6 סוגים של herpesvirus, toxoplasmosis, כמו גם זיהום HIV, יכול לעוות את התוצאה לא פחות מאשר טיפול רשלני לניתוח או באיכות ירודה של ריאגנטים בשימוש. במקרה זה, ייתכן שיהיה צורך במחקרים נוספים, תוך התחשבות בסיכונים האפשריים של המחלה.
תוצאות הבדיקה הרגילות, המעידות על היעדר וירוס בגוף, נחשבות שליליות לכל 4 המבחנים: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA ו- IgG EBNA. כן, כל בדיקה מתבצעת בנפרד, כי אנטיגנים מופיעים בתקופות שונות של המחלה. לפעמים רק בדיקות בודדות ניתן להקצות, אבל ברוב המקרים יש צורך לעשות את כל 4 ניתוחים, אבל בתקופות שונות של המחלה.
לדוגמה, בתקופת הדגירה של המחלה, כמו בהעדר זיהום, אף אחד מארבעת סוגי נוגדנים נמצא בדם. תוצאה כזו לא יכולה להיחשב מספיק, כי זה לא מאפשר להבדיל אדם חולה לאחרונה בריא אחד.
בתחילת ההתפתחות של המחלה הראשית, רק נוגדנים IgM VCA מופיעים בדם. בשלבים הראשונים של המחלה, הם מצטרפים IgG VCA.
צעד חריף זיהום עיקרי מתרחש עם ההיווצרות של שלושה סוגים של נוגדנים: IgG VCA, IgM VCA ו EA IgG, את הנוגדנים מסוג IgG המזוהים ביותר הקופסית אנטיגן. ההרכב זהה של נוגדנים נמשכת ובתוך חצי שנה לאחר השלב החריף של המחלה, אבל כמות IgM VCA הולך ופוחת לאפס.
שישה חודשים לאחר המחלה, נוגדנים של IgG EBNA מופיעים בדם, במקביל איגנוגלובולינים EgG EA להיות פחות IgM VCA נעדרים לחלוטין.
במהלך הכרוני של המחלה או הפעלה מחדש של הנגיף, ייתכן שיש אינדיקטורים שונים. לרוב, כל ארבעת סוגי הנוגדנים נמצאים בדם. אבל זה יכול להיות כי אימונוגלובולינים IgM VCA ו IgG EBNA לא נמצאים.
הסיבוך של זיהום ויראלי על ידי תהליכים סרטניים מתרחשת עם היעדר נוגדנים IgM VCA, ו IgG EBNA immunoglobulins לא מזוהים בכל המקרים.
אבל האינפוזיה האינסופית קובעת לא רק נוכחות של נוגדנים מסוימים, אלא גם את הריכוז שלהם, המאפשר לנו לשפוט ביתר דיוק את שלב הפתולוגיה, כמו גם את התוצאות האפשריות. אין צורך לדבר על דמויות ספציפיות. אחרי הכל, כל מעבדה מנתחת אחת הדרכים האפשריות, באמצעות ריאגנטים שונים, ולכן, בעיצוב הדיגיטלי, את התוצאות של ניתוח של מעבדות שונות עשויים להיות שונים.
החולה מחויב להנפיק טופס שבו יצוינו ערכי הסף (הייחוס) של הערכים. אם התוצאה היא מתחת לסף, זה נחשב מחוון נורמלי (שלילי). אם המספר שנקבע הוא גבוה יותר מאשר ערך הפניה, הכל מציין תוצאה חיובית, כלומר, הנגיף חי בגוף. הערך של הערך שנקבע מציין את שלב המחלה ואת האוכלוסייה של האורגניזם על ידי virions VEB, כלומר על חומרת הפתולוגיה.
אם ELISA נותן תוצאה שלילית, זה רק מציין כי בעבר, אדם לא היה כל קשר עם VEB. אבל האם יש נוכחות וירוס בגוף כיום לומר בוודאות בלתי אפשרי. תוצאה שלילית יכולה לגרום הדגירה של הפתוגן בגוף ונשא וירוסים אסימפטומטיים. לפעמים, על מנת לוודא כי הנגיף אינו נגוע על ידי הגוף, יש צורך לבצע סדרה שנייה של בדיקות לאחר זמן מה.
אם התוצאה של החיסון האינסופי על וירוס אפשטיין-באר היא רק מעט גבוהה יותר מערכי הייחוס, התוצאה נחשבת כמסופקת. הסיבה בדרך כלל הופך את השלב המוקדם של המחלה או נוכחות בגוף של virions של וירוס אחר. במקרה זה, לאחר שבועיים מומלץ לעשות בדיקה שנייה עבור VEB ואולי עבור פתוגנים אחרים.
באשר לשאלה כמה ניתוח נעשה עבור וירוס אפשטיין-בר וכאשר אפשר להמתין לתוצאות, אז לא צפויים קשיים מיוחדים. במעבדה רצינית מאובזרת, התשובה תצטרך לחכות לא יותר מ 2 ימים לאחר מסירה של ביומטרי. במצבים הדורשים ניתוח דחוף, התשובה ניתן להשיג גם לאחר כמה שעות.
כדי לבצע את הניתוח עבור וירוס אפשטיין-בר, יש צורך במעבדה נבדק, שבו יש ריאגנטים איכות ומומחים מוסמכים. ובכל זאת, המחקר הוא שווה את הכסף (ולא ניתוח קטן על סוג אחד של נוגדן עולה איפשהו הדולר 150-170.), גם לא מעוניין עדיין לקבל תוצאה כוזבת, ובהמשך רשאי לבקש שוב, אבל במעבדה אחרת, לניתוח מחדש.