בדיקת אוראז 13c: הכנה, תוצאות, חיובי, שלילי

מאז גילוי חיידק ההליקובקטר פילורי הקשור לדלקת קיבה כרונית וכיב קיבה ותריסריון, פותחו שיטות אבחון, כולל בדיקת אוראז, המאפשרת לזהות מיקרואורגניזמים אלה בחולה ספציפי, לאשר את מעורבותם בהתפתחות מחלות במערכת העיכול ולקבוע טיפול יעיל.

אנזים אוראז כסמן ביולוגי לזיהום הליקובקטר

חיידקי הליקובקטר פילורי מגנים על עצמם מפני הסביבה החומצית בלומן הקיבה בשתי דרכים. ראשית, על ידי פגיעה בקרום הרירי באמצעות השוטונים שלהם, המיקרואורגניזמים מגיעים לשכבות התחתונות שלה, עד לתאי האפיתל, שם רמת החומציות גבוהה יותר (כלומר, החומציות נמוכה יותר). שנית, החיידקים מנטרלים את החומצה על ידי סינתזה של כמויות גדולות של המטלואנזים המולקולרי הגבוה, אוראז או אוריאה אמידהידרולאז, שהוא פעיל קטליטי.

השימוש באוראז באבחון הליקובקטר אפשרי לא רק בשל הפעילות הציטופלזמית של אנזים זה, אלא גם בשל אינטראקציה חיצונית עם תאי מארח.

תחת פעולת אוראז, מתרחש פירוק של אוריאה בקיבה למימן ניטריד (אמוניה) ופחמן דו-חמצני (פחמן דו-חמצני). הם מגיבים עם חומצה הידרוכלורית במיץ הקיבה ומספקים אזור של חומציות ניטרלית סביב הליקובקטר פילורי, וגם תומכים בחילוף החומרים של תאי חיידקים.

זו הסיבה שאוראז היא הגורם החשוב ביותר בהתיישבות של הליקובקטר פילורי ברירית הקיבה האנושית, וגילוי פעילות אוראוליטית נחשב לסמן ביולוגי לאלפיות של חיידק זה, אשר גסטרואנטרולוגים - על ידי ביצוע בדיקת אוראז - משתמשים בו כדי לאבחן זיהום בהליקובקטר, וכן כדי לנטר תוצאות של השמדה (השמדה) של חיידקים הנגרמים על ידי תרופות.

אבחון הליקובקטר פילורי כולל בדיקות פולשניות ולא פולשניות - בהתאם לשאלה האם נדרשת בדיקה אנדוסקופית של הקיבה (פיברוגסטרודואודנוסקופיה) או לא. הבדיקה הפולשנית היא בדיקת אוראז מהירה או בדיקת אוראז אקספרס (RUT-test), הדורשת נטילת דגימות רקמה (ביופסיה). בדיקת נשיפה של אוריאה 13C (13C-UBT) היא הבדיקה הלא פולשנית הנפוצה ביותר.

יש לציין כי אבחון לא פולשני של הליקובקטר פילורי יכול להתבצע באמצעות בדיקת דם לנוגדנים (ספציפיות ברמה של 75%, רגישות - 84%), בדיקת ELISA בשתן (עם רגישות של 96% וספציפיות של 79%), וקו-תוכנית לאנטיגנים חיידקיים. מידע נוסף - זיהום הליקובקטר פילורי: נוגדנים להליקובקטר פילורי בדם.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

אינדיקציות להליך בדיקת אוראז

התיישבות רירית הקיבה על ידי הליקובקטר פילורי כשלעצמה אינה מחלה; זהו גורם לעומס חיידקי מוגבר על הגוף, אשר בתנאים מסוימים יכול לעורר התפתחות של מספר פתולוגיות של הקיבה ומערכת העיכול העליונה.

אינדיקציות לאבחון זיהום בהליקובקטר, ובפרט בדיקת אוראז, קשורות לדלקת קיבה עם חומציות מוגברת, דלקת קיבה אנטרלית ואטרופית, דלקת דודיניטיס, כיב קיבה וכיב תריסריון, לימפומה MALT בקיבה. לאחר כריתה אנדוסקופית של סרטן קיבה בשלב מוקדם, ניתן לבצע בדיקה היסטולוגית בשילוב עם בדיקת אוראז מהירה - FGDS עם בדיקת אוראז.

גסטרואנטרולוגים עשויים לרשום בדיקת אוראז אם מטופלים מתלוננים על תחושת כבדות ואי נוחות באזור האפיגסטרי, צרבת תכופה לאחר אכילה, גיהוקים חמוצים או רקובים, מרירות בפה, בחילות, הפרעות מעיים, כאבים או התכווצויות בבטן.

[ 8 ], [ 9 ]

הכנה

ההכנה לבדיקת נשיפה של אוריאה 13C כוללת הפסקת המטופל: נטילת אנטיביוטיקה 4 שבועות לפני הבדיקה, ותרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות (NSAIDs), מעכבי משאבת פרוטונים (המפחיתים את חומציות הקיבה) ותרופות נוגדות חומצה או חומרים סופחים המשמשים לצרבת - לפחות שבועיים לפני כן. יש להפסיק נטילת תרופות כלשהן חמישה עד שישה ימים, ושתיית אלכוהול ועישון - שלושה ימים לפני הבדיקה.

מומלץ גם להימנע מאכילת קטניות כשבוע לפני הבדיקה, שכן שעועית, אפונה, עדשים, פולי סויה ושעועית מכילים אוראז (המגן על צמחים מפני מחלות ומזיקים).

בערב שלפני הבדיקה, ארוחת ערב מאוחרת וכבדה אינה התווית נגד; ביום הבדיקה יש להקפיד על היגיינת פה רגילה, ושעה וחצי לפני הבדיקה אסור לשתות או להשתמש במסטיקים.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

טֶכנִיקָה בדיקת אוראז

טכניקת יישום:

• ראשית, נלקחת דגימת נשימה בסיסית - נשיפה מיוצרת לתוך מיכל פלסטיק רך (ונסגרת הרמטית);
• נוזל עם תוספת 13C-אוריאה נלקח דרך הפה;
• לאחר 25-30 דקות, דגימה שנייה של אוויר נשוף נלקחת למיכל אחר.

הדגימות המתקבלות בדרך זו מנותחות בספקטרומטר מסות עם הפרדת איזוטופים בדגימה שנייה וקביעת ריכוזם. ההפרש בין הערכים בדגימה השנייה והראשונה מתבטא כדלתא (δ) בהשוואה לרמת הבסיס. ערכים תקינים, כלומר ערכים שליליים של האטום המסומן 13C בחולים לא נגועים, נעים בין 0.15-0.46%, וערכים חיוביים בנוכחות זיהום הם 1.2-9.5% עם קצב הידרוליזה של אוריאה של יותר מ-12-14 מיקרוגרם/דקה.

במילים פשוטות: גילוי של פחמן דו-חמצני המסומן ב-13C באוויר הננשף מצביע על כך שאוריאה עברה הידרוליזה על ידי אנזים האוראז הליקובקטר פילורי, מה שמאשר למעשה את עובדת נוכחותו בקיבה.

בדיקת נשיפה של הליקובקטר פילורי

בדיקת 13C-UBT או בדיקת נשיפה 13C אוריאה עבור הליקובקטר פילורי היא אחת השיטות הלא פולשניות החשובות ביותר לגילוי זיהום זה: עם רגישות של 100% וספציפיות של 98%, הסיכון לתוצאות חיוביות שגויות ושליליות שגויות בהשוואה לבדיקות היסטולוגיה ונוגדנים בדם נמוך ב-2.3%.

הניתוח מבוסס על הידרוליזה של אוריאה נוזלית הניתנת דרך הפה, המסומנת באטום פחמן (איזוטופ יציב לא רדיואקטיבי) 13C (50-75 מ"ג 13C-אוריאה מדוללת ב-100 מ"ל של נוזל) על ידי H. pylori אוראז.

אוריאה המסומנת באינדיקטור איזוטופי עוברת הידרוליזה בקיבה עם שחרור אמוניה ופחמן דו-חמצני המכילים אטומים מסומנים, אשר מתפזרים לדם ומופרשים מהריאות במהלך הנשימה. הפחמן הדו-חמצני המסומן נרשם על ידי מכשיר אנליטי - ספקטרומטר מסות, שפעולתו מבוססת על ספקטרוסקופיה סלקטיבית איזוטופית לא מפזרת, או מנתח ספקטרוסקופי אינפרא אדום.

בדיקת אוראז מהירה

בדיקת אוראז מהירה (RUT) מבוצעת במהלך בדיקה אנדוסקופית של הקיבה והתריסריון - באמצעות אנדופיברוסקופים מודרניים - ואיסוף בו זמנית של דגימות ביופסיה. החומר הביולוגי אמור להילקח מהחלק האנטרללי של הקיבה. לכן, פיברוגסטרודואודנוסקופיה או FGDS עם בדיקת אוראז היא שיטת אבחון פולשנית.

הביופסיה המתקבלת טובלת לחלוטין במדיום סטנדרטי מוכן המכיל ג'ל אגר, אוריאה, פנולסולפופתלאין, אינדיקטור חומצה-בסיס, וחומר בקטריוסטטי (הנוסף למניעת גדילה של מיקרואורגניזמים מזהמים ותוצאות חיוביות שגויות).

אם חיידקי הליקובקטר פילורי נמצאים בדגימת רקמת הקיבה, האוראז שהם מייצרים יפרק הידרוליזה של אוריאה ויעלה את רמת החומציות (pH), דבר הנראה בבירור כאשר המדד משתנה מצהוב לכתום (ב-pH 6.8) וסגול (ב-pH > 8). 75% מהבדיקות החיוביות משנות צבע תוך 120-180 דקות, וככל שהמדד משנה צבע מהר יותר, כך גדל מספר החיידקים. אך בדיקות שנראות שליליות נשמרות למשך 24 שעות.

בדיקת אוראז מהירה חיובית, מה המשמעות? בדיקת RUT חיובית - המחוון הופך לאדום - פירושה שדגימת הביופסיה שהוכנסה למדיום האגר מכילה לפחות 105 חיידקי הליקובקטר פילורי, אם כי ריכוזם בדרך כלל גבוה יותר.

הרגישות של שינויים שונים בבדיקה משתנה בטווח של 90-98%, והספציפיות - 97-99%.

כפי שציינו גסטרואנטרולוגים, אם מסקנת המטופל מצביעה על בדיקת אוראז חיובית בחדות (שלושה צלבים), משמעות הדבר היא: pH> 8, והמחוון שינה את צבעו בפחות מ-60 דקות מרגע טבילת הביופסיה, דבר המצביע על מספר רב של H.pylori ורמת ביטוי גבוהה של אוראז. ניתן לספור את המספר המשוער של חיידקים במהלך בדיקה היסטולוגית של הביופסיה תחת מיקרוסקופ, ואם הוא עולה על 40-50 באזור המוצג, רמת הזיהום נחשבת גבוהה.

בדיקת נשיפה של אוריאה 13C לעיתים רחוקות נותנת תוצאות חיוביות שגויות, ובחולים עם חשד לכיב קיבה או תריסריון, בדיקה חיובית אחת נחשבת לאישור האבחנה, בעוד שתוצאה שלילית צריכה להיות מאושרת על ידי EGD עם בדיקת אוריאה.