PCR של הפטיטיס C

HCV בדרך כלל נעדר בחומר.

בניגוד לשיטות סרולוגיות לאבחון הפטיטיס C נגיפית, המזהות נוגדנים ל-HCV, PCR מאפשר לזהות את נוכחותו של RNA של HCV באופן ישיר ולכמת את ריכוזו בחומר הבדיקה. לבדיקה ספציפיות למין ורגישות גבוהה: עשר מולקולות RNA של HCV בחומר הבדיקה מספיקות כדי לזהות אותה. זיהוי נוגדנים ל-HCV מאשר רק את עובדת ההדבקה של המטופל, אך אינו מאפשר לשפוט את פעילות התהליך הזיהומי (שכפול הנגיף) ואת הפרוגנוזה של המחלה. בנוסף, נוגדנים ל-HCV מתגלים הן בדם של חולים עם הפטיטיס חריפה וכרונית, והן אצל חולים שחלו והחלימו, ולעתים קרובות נוגדנים בדם מופיעים רק מספר חודשים לאחר הופעת התמונה הקלינית של המחלה, דבר המסבך את האבחון. זיהוי HCV בדם באמצעות PCR הוא שיטת אבחון אינפורמטיבית יותר. זיהוי RNA של HCV ב-PCR מצביע על וירמיה, מאפשר לשפוט את שכפול הנגיף בגוף ומשמש כאחד הקריטריונים ליעילות הטיפול האנטי-ויראלי. גילוי של RNA של HCV על ידי PCR בשלבים מוקדמים של זיהום ויראלי בהיעדר מוחלט של סמנים סרולוגיים כלשהם עשוי לשמש כעדות המוקדמת ביותר לזיהום. עם זאת, גילוי מבודד של RNA של HCV בהיעדר מוחלט של סמנים סרולוגיים אחרים אינו יכול לשלול לחלוטין תוצאה חיובית כוזבת של PCR. במקרים כאלה, יש צורך בהערכה מקיפה של מחקרים קליניים, ביוכימיים ומורפולוגיים עם אישור חוזר ונשנה של נוכחות זיהום על ידי PCR.

השימוש בשיטת ה-PCR בחולים עם הפטיטיס C נגיפית כרונית הוא בעל חשיבות רבה, שכן לרובם אין מתאם בין נוכחות שכפול נגיפי לפעילות אנזימי כבד. במקרים כאלה, רק PCR מאפשר לשפוט את נוכחות השכפול הנגיפי, במיוחד אם התוצאה הסופית מתבטאת כמותית. ברוב מקרי המחלה, היעלמות ה-RNA של HCV מסרום הדם מתרחשת מאוחר יותר מנורמליזציה של אנזימי כבד, כך שנורמליזציה שלהם אינה יכולה לשמש בסיס להפסקת טיפול אנטי-ויראלי.

חשוב באופן מעשי לבדוק לא רק את סרום הדם, אלא גם את הלימפוציטים ואת דגימות הפטוביופסיה באמצעות שיטת ה-PCR כדי לזהות RNA של HCV. ניתן לזהות וירוסים פי 2-3 יותר ברקמת הכבד מאשר בסרום הדם. בעת הערכת תוצאות בדיקת RNA של HCV בסרום, יש לזכור כי וירמיה יכולה להיות בעלת אופי משתנה (כמו גם שינויים בפעילות האנזים). לכן, לאחר תוצאות חיוביות של בדיקת PCR, ניתן לקבל תוצאה שלילית ולהיפך. במקרים כאלה, עדיף לבדוק את דגימות הפטוביופסיה כדי לפתור כל ספק שעולה.

גילוי RNA של HCV בחומר באמצעות PCR משמש למטרות הבאות:

• פתרון תוצאות בדיקות סרולוגיות מפוקפקות;
• בידול של הפטיטיס C נגיפית מצורות אחרות של הפטיטיס;
• זיהוי השלב החריף של המחלה בהשוואה לזיהום או למגע הקודמים; קביעת שלב ההדבקה של יילודים מאמהות חיוביות ל-HCV;
• ניטור יעילות הטיפול האנטי-ויראלי.

חולים עם חשד להפטיטיס C נגיפית:

• תורמים;
• אנשים עם גורמי סיכון;
• אנשים עם פעילות ALT מוגברת;
• חולים עם דלקת כבד חריפה

כל המאפיינים שהוזכרו לעיל של הערכת התוצאות והגישות לאבחון HCV באמצעות PCR חלים גם על זיהומים אחרים.

שיטת ה-PCR מאפשרת לא רק לזהות RNA של HCV בחומר הנחקר, אלא גם לקבוע את הגנוטיפ שלו. קביעת גנוטיפ הנגיף חשובה מאוד לבחירת חולים עם הפטיטיס C נגיפית כרונית לטיפול באינטרפרון אלפא וריבאבירין. אינדיקציות מעבדתיות לטיפול בהפטיטיס C נגיפית כרונית עם אינטרפרון אלפא הן כדלקמן:

• פעילות מוגברת של טרנסאמינאזות;
• נוכחות של RNA של HCV בדם;
• גנוטיפ 1 של HCV;
• וירמיה גבוהה בדם (יותר מ-8×105 ^עותקים /מ"ל).

כיום, ניתן לקבוע באופן כמותי את תכולת ה-RNA של HCV בסרום הדם באמצעות שיטת PCR, אשר חשובה מאוד לניטור טיפול באינטרפרון אלפא. רמת הווירמיה מוערכת באופן הבא: עם תכולת RNA של HCV בין 102 ^ל -104 ^עותקים /מ"ל - חלשה; בין ¹⁰⁵ ל-107 ^עותקים /מ"ל - ממוצעת, מעל 108 ^עותקים /מ"ל - גבוהה. עם טיפול יעיל, רמת הווירמיה יורדת.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]