מיקרוסקופיה קונפוקלית

מיקרוסקופיה קונפוקלית נחשבת כיום לאחת השיטות המבטיחות ביותר להדמיית עור in vivo, ולכן העניין בה גבוה באופן יוצא דופן בקרב קלינאים ונציגי מכוני מחקר כאחד.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]

יכולות מיקרוסקופיה קונפוקלית

בדרמטולוגיה, מיקרוסקופ לייזר קונפוקלי משמש למטרות הבאות:

• חקר חדירת תרכובות לעור (נתיבי חדירה, קינטיקה, התפלגות בעור);
• תצפית על תפקוד הבלוטות (קביעת המצב הפעיל והפאסיבי);
• מחקרים של מיטת המיקרו-מחזור הדם (כולל בזמן אמת);
• אבחון של ניאופלזמות.

מבלי לדון ביתרונות ובחסרונות של סוגי המיקרוסקופיה הקונפוקלית שהוזכרו לעיל, נציין כי בשנים האחרונות, מיקרוסקופיה קונפוקלית בלייזר פלואורסצנטי הפכה פופולרית יותר ויותר.

[ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

מיקרוסקופיה קונפוקלית לבדיקת עור

המיקרוסקופ הקונפוקלי מספק שתי הזדמנויות יקרות ערך - חקר רקמות ברמה התאית במצב של פעילות פיזיולוגית חיונית והדגמת תוצאות המחקר (כלומר, פעילות תאית) בארבעה ממדים - גובה, רוחב, עומק וזמן. מבחינת איכות התמונה ועומק המחקר, התפקיד החשוב ביותר ממלא יכולת הרקמה להעביר אור, במילים אחרות, שקיפותה. שיטת המיקרוסקופיה הקונפוקלית היא ללא מגע, קרן האור אינה גורמת נזק או אי נוחות למטופל הנבדק או לחיית הניסוי.

מיקרוסקופיית לייזר סורק קונפוקלית (CSLM) משמשת לבדיקת העור. השיטה מאפשרת לראות את האפידרמיס ואת השכבה הפפילרית של הדרמיס ברזולוציה הקרובה להיסטולוגית. כל תוצאות הבדיקה מוצגות על הצג ונשמרות כחבילה של קבצי תמונה (כמיקרופילם (בדינמיקה) או מיקרו-צילומים).

ישנם שני סוגים של השיטה:

• רפלקטיבי (השתקפות CSLM) - מבוסס על העובדה שלמבנים תאיים ובין-תאיים שונים יש מדדי שבירה שונים של אור, המאפשרים קבלת תמונה מנוגדת.
• פלואורסצנציה (פלואורסצנציה CSLM) - משתמשת באור לייזר החודר לעור ומעורר בו אקסו- או אנדוכרומופורים, אשר בתגובה מתחילים לפלוט פוטונים (כלומר, פלואורסצנציה).

רזולוציה צירית היא המרחק המינימלי בין נקודות הממוקמות על מישור אופקי, כלומר מישור מקביל לפני העור. רזולוציה צירית היא המרחק המינימלי בין נקודות הממוקמות על מישור ניצב לפני העור.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

היסטוריה של מיקרוסקופיה קונפוקלית

הרעיון של יצירת מיקרוסקופ המסוגל להציג חתך של רקמה חיה ברמה התאית פותח באופן פעיל לפני 130 שנה. המרכיב העיקרי של מיקרוסקופים מודרניים תוכנן בסוף המאה ה-19 והיה דיסק מסתובב עם חורים זעירים המסודרים בספירלה. דיסק זה הומצא בשנת 1883 על ידי סטודנט גרמני פאול ניפקוב, שעל שמו הוא נקרא - דיסק ניפקוב (או דיסק ניפקוב). ההמצאה התבססה על יכולתו של אור, העובר דרך חורים זעירים בדיסק ועדשת מגדלת, לחדור עמוק לתוך הרקמה ולהאיר שבר תא במרחק מפני השטח. כאשר הדיסק מסתובב במהירות, השברים יוצרים תמונה אחת. על ידי הזזת המבנה הרחק מהאובייקט או קרוב אליו, ניתן לשנות את עומק החתך האופטי של הרקמה הנחקרת.

רק עם הופעתם של מכשירי וידאו בשנות ה-80 ומחשבים המסוגלים לעבד תמונות בתחילת שנות ה-90, התאפשר ליצור ולהשתמש ביעילות במיקרוסקופים המודרניים המשמשים כיום.