קורינבקטריום

דיפתריה היא מחלה זיהומית חריפה, הפוגעת בעיקר בילדים, המתבטאת בשיכרון עמוק של הגוף עם רעלן דיפתריה ודלקת פיברין אופיינית באתר מיקומו של הפתוגן. שם המחלה מגיע מהמילה היוונית דיפתרה - עור, שכבה, שכן נוצר שכבה צפופה, אפרפרה-לבנה באתר רביית הפתוגן.

הגורם לדיפתריה - Corynebacterium diphtheriae - התגלה לראשונה בשנת 1883 על ידי א. קלבס בחתכי סרט, והתקבל בתרבית טהורה בשנת 1884 על ידי פ. לפלר. בשנת 1888, א. רו וא. ירזין גילו את יכולתו לייצר אקסוטוקסין, אשר ממלא תפקיד מרכזי באטיולוגיה ובפתוגנזה של דיפתריה. ייצור סרום נוגד רעלים על ידי א. ברינג בשנת 1892 והשימוש בו מאז 1894 לטיפול בדיפטריה אפשרו להפחית משמעותית את התמותה. התקפה מוצלחת על מחלה זו החלה לאחר 1923 בקשר עם פיתוח שיטה להשגת אנטוקסין דיפתריה על ידי ג. ריאון.

הגורם לדיפתריה שייך לסוג קורינובקטריום (מחלקה אקטינובקטריה). מבחינה מורפולוגית, הוא מאופיין בכך שהתאים בצורת מועדון ומעובה בקצוות (קורין ביוונית - מועדון), יוצרים ענפים, במיוחד בתרבויות עתיקות, ומכילים תכלילים גרגיריים.

הסוג קורינבקטריום כולל מספר רב של מינים, המחולקים לשלוש קבוצות.

• קורינבקטריה היא טפיל של בני אדם ובעלי חיים ופתוגנית עבורם.
• קורינבקטריה פתוגנית לצמחים.
• קורינבקטריה לא פתוגנית. מינים רבים של קורינבקטריה הם תושבים רגילים של העור, הריריות של הלוע, האף והלוע, העיניים, דרכי הנשימה, השופכה ואיברי המין.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

מורפולוגיה של קורינבקטריה

C. diphtheriae הם מוטות ישרים או מעוקלים מעט, לא ניידים, באורך של 1.0-8.0 מיקרומטר ובקוטר של 0.3-0.8 מיקרומטר; הם אינם יוצרים נבגים או קפסולות. לעתים קרובות יש להם נפיחות בקצה אחד או בשני הקצוות, ולעתים קרובות מכילים גרגירים מטא-כרומטיים - גרגירי וולוטין (פולימטפוספטים), אשר מקבלים צבע כחלחל-סגול כאשר הם נצבעים בכחול מתילן. לגילוי שלהם הוצעה שיטת צביעה מיוחדת של נייסר. במקרה זה, המוטות נצבעים בצהוב קש, וגרגירי הוולוטין חומים כהים, ובדרך כלל ממוקמים בקטבים. Corynebacterium diphtheriae נצבע היטב בצבעי אנילין, הוא גרם-חיובי, אך בתרבויות ישנות הוא לעתים קרובות הופך לדהוי ובעל צביעה שלילית לפי גרם. הוא מאופיין בפולימורפיזם בולט, במיוחד בתרבויות ישנות ותחת השפעת אנטיביוטיקה. תכולת G + C ב-DNA היא כ-60 מול %.

תכונות ביוכימיות של קורינבקטריה

חיידק הדיפתריה הוא אירובי או אנאירובי פקולטטיבי, הטמפרטורה האופטימלית לגדילה היא 35-37 מעלות צלזיוס (גבולות הגדילה הם 15-40 מעלות צלזיוס), ה-pH האופטימלי הוא 7.6-7.8. הוא אינו תובעני במיוחד למצעים מזינים, אך גדל טוב יותר על מצע המכיל סרום או דם. מצע סרום קרוש מסוג Roux או Loeffler הוא סלקטיבי לחיידקי דיפתריה, גדילה עליהם מופיעה לאחר 8-12 שעות בצורת מושבות קמורות בגודל ראש סיכה, בצבע לבן-אפרפר או קרם-צהבהב. פני השטח שלהם חלקים או מעט גרגיריים, בשוליים המושבות שקופות מעט יותר מאשר במרכז. המושבות אינן מתמזגות, וכתוצאה מכך התרבית מקבלת מראה של עור ירוק-שחור. על הציר, הגדילה מתבטאת בעכירות אחידה, או שהציר נשאר שקוף, וסרט עדין נוצר על פניו, אשר בהדרגה מתעבה, מתפורר ושוקע בפתיתים לתחתית.

מאפיין של חיידקי דיפתריה הוא גדילתם הטובה על מצע דם וסרום המכיל ריכוזים כאלה של אשלגן טלוריט עד כדי דיכוי גדילתם של סוגים אחרים של חיידקים. זאת בשל העובדה ש-C. diphtheriae מפחית אשלגן טלוריט לטלור מתכתי, אשר, לאחר ששקע בתאים מיקרוביאליים, מעניק למושבות צבע אפור כהה או שחור אופייני. השימוש במצעים כאלה מגדיל את אחוז זריעת חיידקי הדיפתריה.

קורינבקטריום דיפתריה (Corynebacterium diphtheriae) מתסיס גלוקוז, מלטוז וגלקטוז תוך יצירת חומצה ללא גז, אך אינו מתסיס (ככלל) סוכרוז, מכיל ציסטינאז, אינו מכיל אוראז ואינו יוצר אינדול. על פי מאפיינים אלה, הם נבדלים מאותם חיידקי קורינפורם (דיפתרואידים) הנמצאים לרוב על רירית העין (Corynebacterium xerosus) והאף והלוע (Corynebacterium pseiidodiphtheriticum) ומדיפתרואידים אחרים.

בטבע, ישנם שלושה וריאנטים עיקריים (ביוטיפים) של חיידק הדיפתריה: גרביס, אינטרמדין ומיטיס. הם נבדלים זה מזה בתכונות מורפולוגיות, תרבותיות, ביוכימיות ואחרות.

חלוקת חיידקי הדיפתריה לביו-טיפים נעשתה תוך התחשבות בצורות הדיפתריה בחולים שאיתן הם מבודדים בתדירות הגבוהה ביותר. סוג הגרביס מבודד לרוב מחולים עם צורה קשה של דיפתריה וגורם להתפרצויות קבוצתיות. סוג המיטיס גורם למקרים קלים וספורדיים יותר של המחלה, וסוג הביניים תופס עמדה ביניים ביניהם. קורינבקטריום בלפנטי, שיוחס בעבר לביו-טיפ המיטיס, מבודד כביו-טיפ עצמאי, רביעי. ההבדל העיקרי שלו מהביו-טיפים גרביס ומיטיס הוא היכולת להפחית ניטרטים לניטריטים. לזני קורינבקטריום בלפנטי תכונות הדבקה בולטות, וביניהם נמצאים גם וריאנטים רעילים וגם וריאנטים לא רעילים.

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

מבנה אנטיגני של קורינבקטריה

חיידק הקורינובקטריום הוא הטרוגני מאוד ומוזאי. כמה עשרות אנטיגנים סומטיים נמצאו בכל שלושת סוגי פתוגני הדיפתריה, לפיהם הם מחולקים לסרוטיפים. ברוסיה אומץ סיווג סרולוגי, לפיו נבדלים 11 סרוטיפים של חיידקי דיפתריה, מתוכם 7 הם עיקריים (1-7) ו-4 הם סרוטיפים נוספים, הנפוצים לעיתים רחוקות (8-11). שישה סרוטיפים (1, 2, 3, 4, 5, 7) שייכים לסוג גרביס, וחמישה (6,8,9,10,11) שייכים לסוג מיטיס. חיסרון של שיטת הסרוטיפ הוא שלזנים רבים, במיוחד כאלה שאינם רעילים, יש התלכדות ספונטנית או יכולת רב-התלכדות.

[ 11 ]

טיפוס פאג'ים של Corynebacterium diphtheriae

הוצעו מגוון סכמות של סיווג פאג'ים להבחנה בין חיידקי דיפתריה. על פי הסכמה של מ.ד. קרילובה, באמצעות קבוצה של 9 פאג'ים (A, B, C, D, F, G, H, I, K), ניתן לסמן את רוב הזנים הטוקסיגניים והלא-טוקסיגניים מסוג גרביס. בהתחשב ברגישות לפאג'ים שצוינו, כמו גם בתכונות תרבותיות ואנטיגניות וביכולת לסנתז קוריצינים (חלבונים חיידקיים), מ.ד. קרילובה זיהתה 3 קבוצות בלתי תלויות של קורינבקטריה מסוג גרביס (I-III). כל אחת מהן מכילה תת-קבוצות של אנלוגים טוקסיגניים ולא-טוקסיגניים של פתוגני דיפתריה.

עמידות לקורינבקטריה

Corynebacterium diphtheriae מפגין עמידות גבוהה לטמפרטורות נמוכות, אך מת במהירות בטמפרטורות גבוהות: ב-60 מעלות צלזיוס - תוך 15-20 דקות, וברתיחה - לאחר 2-3 דקות. כל חומרי החיטוי (ליזול, פנול, כלורמין וכו') בריכוז הרגיל הורסים אותו תוך 5-10 דקות. עם זאת, פתוגן הדיפתריה סובל ייבוש היטב ויכול להישאר בר-קיימא לאורך זמן בריר יבש, רוק וחלקיקי אבק. באירוסול דק, חיידקי הדיפתריה נשארים ברי-קיימא במשך 24-48 שעות.

גורמי פתוגניות של קורינבקטריה

הפתוגניות של Corynebacterium diphtheriae נקבעת על ידי נוכחות של מספר גורמים.

גורמי הידבקות, קולוניזציה ופלישה

המבנים האחראים להידבקות לא זוהו, אך בלעדיהם חיידק הדיפתריה לא היה מסוגל ליישב תאים. תפקידם מתבצע על ידי כמה מרכיבים של דופן התא של הפתוגן. התכונות הפולשניות של הפתוגן קשורות להיאלורונידאז, נוראמינידאז ופרוטאז.

גליקוליפיד רעיל הנמצא בדופן התא של הפתוגן. זהו 6,6'-דיאסטר של טרהלוז המכיל חומצה קורינמיקולית (C32H64O3) וחומצה קורינמיקולית (C32H62O3) ביחסים אקווימולריים (טרהלוז-6,6'-דיקורינמיקולאט). לגליקוליפיד יש השפעה הרסנית על תאי הרקמה באתר רביית הפתוגן.

אקסוטוקסין, הקובע את הפתוגניות של הפתוגן ואת אופי הפתוגנזה של המחלה. וריאנטים לא טוקסיגניים של C. diphtheriae אינם גורמים לדיפטריה.

האקסוטוקסין מסונתז כקודמן לא פעיל - שרשרת פוליפפטיד יחידה בעלת משקל מולקולרי של 61 kD. הוא מופעל על ידי הפרוטאז החיידקי עצמו, אשר חותך את הפוליפפטיד לשני פפטידים המקושרים באמצעות קשרי דיסולפיד: A (משקל מולקולרי 21 kD) ו-B (משקל מולקולרי 39 kD). פפטיד B מבצע פונקציית קולטן - הוא מזהה את הקולטן, נקשר אליו ויוצר תעלה תוך-ממברנלית שדרכה פפטיד A חודר לתא ומיישם את הפעילות הביולוגית של הרעלן. פפטיד A הוא אנזים ADP-ריבוזילטרנספראז, המבטיח את העברת אדנוזין דיפוספט ריבוז מ-NAD לאחת משאריות חומצות האמינו (היסטידין) של גורם התארכות החלבון EF-2. כתוצאה מהשינוי, EF-2 מאבד את פעילותו, וזה מוביל לדיכוי סינתזת החלבון על ידי ריבוזומים בשלב הטרנסלוקציה. הרעלן מסונתז רק על ידי אותם C. diphtheriae הנושאים את הגנים של הפרופאג' הממיר המתון בכרומוזום שלהם. האופרון המקודד לסינתזה של הרעלן הוא מונוציסטרוני, הוא מורכב מ-1.9 אלף זוגות נוקלאוטידים ויש לו פרומוטר toxP ו-3 אזורים: toxS, toxA ו-toxB. אזור ה-toxS מקודד 25 שיירי חומצות אמינו של פפטיד הסיגנל (הוא מבטיח את שחרור הרעלן דרך הממברנה אל החלל הפריפלזמי של התא החיידקי), toxA - 193 שיירי חומצות אמינו של פפטיד A, ו-toxB - 342 שיירי חומצות אמינו של פפטיד B של הרעלן. אובדן הפרופאג' על ידי התא או מוטציות באופרון ה-tox הופכים את התא למעט טוקסיגני. להיפך, ליזוגניזציה של C. diphtheriae לא טוקסיגני על ידי הפאג' הממיר הופכת אותם לחיידקים טוקסיגניים. זה הוכח באופן חד משמעי: הטוקסיגניות של חיידקי דיפתריה תלויה בליזוגניזציה שלהם על ידי קורינפאגים הממירים רעלים. קורינפאגים משתלבים בכרומוזום של קורינבקטריה באמצעות מנגנון של רקומבינציה ספציפית לאתר, וזנים של חיידקי דיפתריה יכולים להכיל 2 אתרי רקומבינציה (attB) בכרומוזומים שלהם, וקורינפאגים משתלבים בכל אחד מהם באותה תדירות.

ניתוח גנטי של מספר זנים לא-רעילים של חיידקי דיפתריה, שבוצע באמצעות גלאי DNA מסומנים הנושאים שברי אופרון הקורינפאג' הרעילים, הראה כי הכרומוזומים שלהם מכילים רצפי DNA הומולוגיים לאופרון הקורינפאג' הרעילים, אך הם מקודדים פוליפפטידים לא פעילים או נמצאים במצב "שקט", כלומר לא פעילים. בהקשר זה, עולה שאלה אפידמיולוגית חשובה מאוד: האם חיידקי דיפתריה לא-רעילים יכולים להפוך לטוקסיגניים בתנאים טבעיים (בגוף האדם), בדומה למה שקורה במבחנה? האפשרות של טרנספורמציה כזו של תרביות לא-רעילות של חיידקי קורינפאג' לטוקסיגניות באמצעות המרת פאג'ים הודגמה בניסויים על שרקנים, עוברי תרנגולות ועכברים לבנים. עם זאת, האם זה קורה במהלך תהליך המגיפה הטבעי (ואם כן, באיזו תדירות) טרם נקבע.

בשל העובדה שלרעלן הדיפתריה בגוף החולים יש השפעה סלקטיבית וספציפית על מערכות מסוימות (מערכת הסימפתטית-אדרנלית, הלב, כלי הדם והעצבים ההיקפיים מושפעים בעיקר), ברור שהוא לא רק מעכב ביוסינתזה של חלבונים בתאים, אלא גם גורם להפרעות אחרות בחילוף החומרים שלהם.

ניתן להשתמש בשיטות הבאות כדי לזהות את רעילותם של חיידקי דיפתריה:

• ניסויים ביולוגיים בבעלי חיים. זיהום תוך-עורי של שרקנים עם תסנין של תרבית מרק של חיידקי דיפתריה גורם לנמק באתר ההזרקה. מינון קטלני מינימלי אחד של רעלן (20-30 ננוגרם) הורג שרק במשקל 250 גרם כאשר מוזרק תת עורי ביום הרביעי-חמישי. הביטוי האופייני ביותר של פעולת הרעלן הוא נזק לבלוטות יותרת הכליה, שהן מוגדלות והיפרמיות בחדות.
• זיהום עוברי עוף. רעלן דיפתריה גורם למותם.
• זיהום של תרביות תאים. רעלן דיפתריה גורם להשפעה ציטופתית מובהקת.
• מבחן אימונוסורבנט מקושר אנזים בשלב מוצק באמצעות אנטיטוקסינים המסומנים בפרוקסידאז.
• שימוש בגשש DNA לגילוי ישיר של אופרון הטוקס בכרומוזום של חיידקי דיפתריה.

עם זאת, השיטה הפשוטה והנפוצה ביותר לקביעת רעילותם של חיידקי דיפתריה היא סרולוגית - שיטת משקעים בג'ל. מהותה היא כדלקמן. רצועה של נייר סינון סטרילי בגודל 1.5 x 8 ס"מ רטובה בסרום אנטי-רעיל נגד דיפתריה המכיל 500 AE ב-1 מ"ל ומורחת על פני השטח של מצע התזונה בצלחת פטרי. הצלחת מיובשת בתרמוסטט למשך 15-20 דקות. תרביות הבדיקה זורעות בפלאקים משני צידי הנייר. מספר זנים זורעים על צלחת אחת, שאחד מהם, בעל אופי רעיל באופן ברור, משמש כביקורת. הצלחות עם התרביות מודגרות ב-37 מעלות צלזיוס, והתוצאות נלקחות בחשבון לאחר 24-48 שעות. עקב דיפוזיה נגדית של האנטיטוקסין והרעלן בג'ל, נוצר קו משקעים ברור במקום האינטראקציה ביניהם, המתמזג עם קו המשקעים של זן הביקורת הרעיל. רצועות משקעים לא ספציפיות (הן נוצרות אם, בנוסף לאנטיטוקסין, נוגדנים אנטי-מיקרוביאליים אחרים נמצאים בכמויות קטנות בסרום) מופיעות מאוחר, מתבטאות בצורה חלשה ולעולם אינן מתמזגות עם רצועת המשקעים של זן הביקורת.

חסינות לאחר זיהום

מקרים חזקים, מתמשכים, כמעט לכל החיים, חוזרים ונשנים של המחלה נצפים לעיתים נדירות - ב-5-7% מאלה שחלו במחלה. החסינות היא בעיקר נוגדת רעלים באופייה, נוגדנים אנטי-מיקרוביאליים פחות חשובים.

מבחן שיק היה בעבר בשימוש נרחב להערכת רמת החסינות נגד דיפתריה. למטרה זו, 1/40 מרעלן שפן הים בנפח של 0.2 מ"ל הוזרק תוך-עורית לילדים. בהיעדר חסינות אנטי-רעלית, אדמומיות ונפיחות בקוטר של יותר מ-1 ס"מ מופיעות באתר ההזרקה לאחר 24-48 שעות. תגובת שיק חיובית כזו מצביעה על היעדר מוחלט של אנטי-טוקסין או על כך שתכולתו נמוכה מ-0.001 AE/מ"ל דם. תגובת שיק שלילית נצפית כאשר תכולת האנטיטוקסין בדם גבוהה מ-0.03 AE/מ"ל. אם תכולת האנטיטוקסין נמוכה מ-0.03 AE/מ"ל אך גבוהה מ-0.001 AE/מ"ל, תגובת שיק יכולה להיות חיובית או, לעיתים, שלילית. בנוסף, לרעלן עצמו יש תכונה אלרגנית בולטת. לכן, כדי לקבוע את רמת החסינות נגד דיפתריה (תוכן כמותי של אנטיטוקסין), עדיף להשתמש ב-RPGA עם בדיקת דם אבחנתית רגישת לטוקסואיד דיפתריה.

אפידמיולוגיה של דיפתריה

מקור ההדבקה היחיד הוא אדם - אדם חולה, אדם מחלים או נשא בריא של החיידק. ההדבקה מתרחשת דרך טיפות הנישאות באוויר, אבק הנישא באוויר, ודרך חפצים שונים המשמשים נשאים חולים או בריאים: כלים, ספרים, מצעים, צעצועים וכו'. במקרה של זיהום של מוצרי מזון (חלב, קרמים וכו'), ההדבקה אפשרית דרך מערכת העיכול. ההפרשה המסיבית ביותר של הפתוגן מתרחשת בצורה החריפה של המחלה. עם זאת, אנשים עם צורות סמויות ולא טיפוסיות של המחלה הם בעלי המשמעות האפידמיולוגית הגדולה ביותר, מכיוון שלעתים קרובות הם אינם מאושפזים ואינם מתגלים באופן מיידי. חולה עם דיפתריה מדבק במהלך כל תקופת המחלה וחלק מתקופת ההחלמה. תקופת הנשיאה הממוצעת של חיידקים אצל אנשים מחלימים נעה בין שבועיים ל-7 שבועות, אך יכולה להימשך עד 3 חודשים.

נשאים בריאים ממלאים תפקיד מיוחד באפידמיולוגיה של דיפתריה. בתנאים של תחלואה ספורדית, הם המפיצים העיקריים של דיפתריה, ותורמים לשימור הפתוגן בטבע. משך הנשיאה הממוצע של זנים רעילים קצר במקצת (כ-2 חודשים) מאשר זנים שאינם רעילים (כ-2-3 חודשים).

הסיבה להיווצרות נשאות בריאה של חיידקי דיפתריה רעילים ולא רעילים לא נחשפה במלואה, שכן אפילו רמה גבוהה של חסינות אנטי-רעלית לא תמיד מבטיחה שחרור מוחלט של הגוף מהפתוגן. ייתכן שלרמת החסינות האנטיבקטריאלית יש משמעות מסוימת. משמעות אפידמיולוגית ראשונית היא נשאות של זנים רעילים של חיידקי דיפתריה.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

תסמינים של דיפתריה

אנשים בכל גיל רגישים לדיפטריה. הפתוגן יכול לחדור לגוף האדם דרך ריריות של איברים שונים או דרך עור פגום. בהתאם למיקום התהליך, נבדלות דיפתריה של הלוע, האף, הגרון, האוזן, העין, איברי המין והעור. צורות מעורבות אפשריות, למשל, דיפתריה של הלוע והעור וכו'. תקופת הדגירה היא 2-10 ימים. בצורה המתבטאת קלינית של דיפתריה, מתפתחת דלקת פיברינוזית אופיינית של הקרום הרירי במקום מיקום הפתוגן. הרעלן המיוצר על ידי הפתוגן משפיע תחילה על תאי האפיתל, ולאחר מכן על כלי הדם הסמוכים, ומגביר את חדירותם. התפליש היוצא מכיל פיברינוגן, שקרישתו מובילה להיווצרות ציפוי קרומי אפרפר-לבן על פני הקרום הרירי, המחובר היטב לרקמה הבסיסית וכאשר הוא נקרע, גורם לדימום. התוצאה של נזק לכלי הדם עשויה להיות התפתחות בצקת מקומית. דיפתריה של הלוע מסוכנת במיוחד, מכיוון שהיא עלולה לגרום לקרופ דיפתרי עקב בצקת של רירית הגרון ומיתרי הקול, שממנה 50-60% מהילדים עם דיפתריה מתו כתוצאה מחנק. רעלן הדיפתריה, החודר לדם, גורם להרעלה עמוקה כללית. הוא משפיע בעיקר על מערכת הלב וכלי הדם, מערכת האדרנל הסימפתטית ועצבים היקפיים. לפיכך, תסמיני הדיפתריה מורכבים משילוב של סימנים מקומיים התלויים בלוקיישן של שער הכניסה, ותסמינים כלליים הנגרמים מהרעלה עם הרעלן ומתבטאים בצורה של אדינמיה, עייפות, עור חיוור, לחץ דם נמוך, דלקת שריר הלב, שיתוק של עצבים היקפיים והפרעות אחרות. דיפתריה אצל ילדים מחוסנים, אם נצפית, בדרך כלל מתפתחת בצורה קלה וללא סיבוכים. שיעור התמותה בתקופה שלפני השימוש בסרותרפיה ואנטיביוטיקה היה 50-60%, כיום הוא 3-6%.

אבחון מעבדתי של דיפתריה

השיטה היחידה לאבחון מיקרוביולוגי של דיפתריה היא בקטריולוגית, עם בדיקה חובה של תרבית מבודדת של קורינבקטריה לאיתור רעילות. מחקרים בקטריולוגיים לדיפתריה מתבצעים בשלושה מקרים:

• לאבחון דיפתריה אצל ילדים ומבוגרים עם תהליכים דלקתיים חריפים בלוע, באף ובאף-לוע;
• על פי אינדיקציות אפידמיולוגיות של אנשים שהיו במגע עם מקור פתוגן הדיפתריה;
• אנשים שהתקבלו לאחרונה לבתי יתומים, מעונות, פנימיות ומוסדות מיוחדים אחרים לילדים ולמבוגרים, על מנת לזהות נשאים אפשריים של חיידק הדיפתריה ביניהם.

החומר למחקר הוא ריר מהלוע והאף, סרט מהשקדים או ממברנות ריריות אחרות, שהן נקודת הכניסה לפתוגן. הזריעה מתבצעת על סרום טלוריט או מצע דם ובמקביל על מצע קרוש של סרום Roux (סרום סוסים קרוש) או Loeffler (3 חלקים סרום בקר + חלק אחד ציר סוכר), עליו מופיעה צמיחת קורינבקטריה לאחר 8-12 שעות. התרבית המבודדת מזוהה על ידי שילוב של תכונות מורפולוגיות, תרביתיות וביוכימיות, תוך שימוש בשיטות טיפוס סרו ופאג' במידת האפשר. בכל המקרים, בדיקת רעילות באמצעות אחת מהשיטות הנ"ל היא חובה. התכונות המורפולוגיות של קורינבקטריה נחקרות בצורה הטובה ביותר באמצעות שלוש שיטות לצביעת תכשיר מריחה: גראם, נייסר וכחול מתילן (או כחול טולואידין).

טיפול בדיפטריה

טיפול ספציפי לדיפטריה הוא שימוש בסרום נוגד רעלים נגד דיפתריה המכיל לפחות 2000 יחידות בינלאומיות (IU) לכל 1 מ"ל. הסרום ניתן תוך שרירית במינונים של 10,000 עד 400,000 יחידות בינלאומיות, בהתאם לחומרת המחלה. שיטת טיפול יעילה היא שימוש באנטיביוטיקה (פניצילין, טטרציקלינים, אריתרומיצין וכו') וסולפונמידים. כדי לעודד את ייצור האנטיטוקסינים שלו, ניתן להשתמש באנטוקסין. כדי להיפטר מהנשאה של החיידקים, יש להשתמש באנטיביוטיקה שהזן הנתון של קורינבקטריה רגיש לה מאוד.

מניעה ספציפית של דיפתריה

השיטה העיקרית למאבק בדיפטריה היא חיסון מתוכנן המוני של האוכלוסייה. לשם כך, נעשה שימוש באפשרויות חיסון שונות, כולל חיסונים משולבים, כלומר שמטרתם ליצור בו זמנית חסינות כנגד מספר פתוגנים. החיסון הנפוץ ביותר ברוסיה הוא DPT. זהו תרחיף של חיידקי שעלת הספוחים על אלומיניום הידרוקסיד, המומתים על ידי פורמלין או תימרוסל (20 מיליארד ב-1 מ"ל), ומכיל טוקסואיד דיפתריה במינון של 30 יחידות פלוקולציה ו-10 יחידות של טוקסואיד טטנוס ב-1 מ"ל. ילדים מחוסנים מגיל 3 חודשים, ולאחר מכן מתבצעים חיסונים חוזרים: הראשון לאחר 1.5-2 שנים, הבא בגיל 9 ו-16 שנים, ולאחר מכן כל 10 שנים.

הודות לחיסון ההמוני, שהחל בברית המועצות בשנת 1959, שיעור התחלואה בדיפטריה במדינה עד 1966, בהשוואה ל-1958, ירד פי 45, והמדד שלה בשנת 1969 היה 0.7 לכל 100,000 תושבים. הירידה שלאחר מכן בהיקף החיסונים בשנות ה-80 הובילה לתוצאות חמורות. בשנים 1993-1996, רוסיה נסחפה על ידי מגפת דיפתריה. מבוגרים, בעיקר אלו שלא חוסנו, וילדים חלו. בשנת 1994 נרשמו כמעט 40 אלף חולים. בקשר לכך, חודשו החיסונים ההמוניים. במהלך תקופה זו חוסנו 132 מיליון איש, כולל 92 מיליון מבוגרים. בשנים 2000-2001, כיסוי הילדים שחוסנו בתקופה שנקבעה היה 96%, ועם חיסון חוזר - 94%. עקב כך, שכיחות הדיפתריה בשנת 2001 ירדה פי 15 בהשוואה לשנת 1996. עם זאת, על מנת להפחית את השכיחות למקרים בודדים, יש צורך לחסן לפחות 97-98% מהילדים בשנה הראשונה לחייהם ולהבטיח חיסון חוזר המוני בשנים שלאחר מכן. לא סביר שהדיפתריה תימחק לחלוטין בשנים הקרובות עקב נשאות נרחבת של חיידקי דיפתריה רעילים ולא רעילים. כמו כן, ייקח זמן מה לפתור בעיה זו.