חלבון בנס-ג'ונס

שתן של אדם בריא אינו מכיל חלבון Bence-Jones, המיוצג על ידי שרשראות קלות של אימונוגלובולינים המזוהים כתוצאה מהיווצרות תהליכי גידול ממאירים.

בדיקות מעבדה לנוכחות חלבונים ספציפיים בעלי משקל מולקולרי נמוך נחוצות לאבחון מספר מצבים פתולוגיים (לרוב בעיות במערכת החיסון β), וכן לקביעת יעילות הטיפול בו נעשה שימוש.

בעודף, חלבון בנס-ג'ונס מיוצר על ידי תאי פלזמה, נע עם זרם הדם ומופרש דרך מתן שתן. תכונה זו של גופי חלבון היא המאפשרת לחשוד במחלות הבאות בעת בדיקת שתן:

• מיאלומה;
• אוסטאוסרקומה;
• פלסמציטומה;
• לוקמיה לימפוציטית כרונית;
• לימפוגרנולומטוזיס;
• עמילואידוזיס ראשונית;
• מקרוגלובולינמיה;
• גמופתיה חד שבטית אידיאפתית.

הקשר בין שחרור חלבון ספציפי לבין תפקוד כלייתי לקוי לאחר מכן הנגרמת מההשפעה הרעילה של גופי חלבון על המבנים האפיתליים של צינוריות הכליה, אשר בתורן גורם לתופעת הניוון, תסמונת פאנקוני ועמילואידוזיס כלייתי, אושר קלינית.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

חלבון של בנס ג'ונס בשתן

נוכחות חלבון בשתן נקראת פרוטאינוריה. פרוטאינוריה פרה-כליתית מובנת כנוכחות של כמות עצומה של חלבון בעל מולקולות נמוכות בשתן. במקרה זה, אין נזק למסנן הכלייתי ולצינוריות, ותפקוד כלייתי תקין אינו מסוגל להבטיח את ספיגת גופי החלבון. פרוטאינוריה חוץ-כליתית (שקרית), כלומר המתרחשת ללא פגיעה בתפקוד הכליות, מצביעה על נוכחות של תהליך זיהומי או ממאיר בגוף. פרוטאינוריה נצפית ב-60-90% מהמקרים של חולי מיאלומה. כ-20% מהמצבים הפתולוגיים הם מיאלומה מסוג בנס-ג'ונס.

חלבון Bence-Jones בשתן מתמיין עקב שינויים הומורליים במערכת החיסון β. הופעת גופי חלבון קשורה לפתולוגיה של מיאלומה, המובלסטוזות פאראפרוטאינמיות, אנדותליוזיס, מקרוגלובולינמיה של וולדנסטרום, לוקמיה לימפטית ואוסטאוסרקומות. גילוי חלבון Bence-Jones בשתן הוא שלב אבחוני ופרוגנוסטי חשוב. בשל משקלו המולקולרי הנמוך, חלבון Bence-Jones מופרש בשתן, ופוגע באפיתל של צינוריות הכליה, דבר שעלול להוביל להתפתחות אי ספיקת כליות, אשר עלולה להוביל למוות. סיווג בזמן של החלבון לפי הסוג חשוב גם כן: לחלבון λ יש השפעה כלורתוקסית גדולה יותר מאשר לחלבון κ.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

בדיקת חלבון בנס ג'ונס

נוכחות גופי חלבון שאינם סרום בשתן מעידה על לוקמיה לימפטית, אוסטאוסרקומה או מיאלומה (תהליכים סרטניים של מח העצם). חלבון בנס-ג'ונס, כאשר מחממים את תסנין השתן ל-45-60 מעלות צלזיוס, שוקע כמשקע עכור ששוקע על דפנות המבחנה. עלייה נוספת בטמפרטורה לערכי רתיחה ממיסה את העכירות המופרדת.

הבדיקה הכמותית לחלבון בנס ג'ונס מתבצעת באופן הבא:

• שימוש בחלק מים ובחלק חומצה חנקתית כריאגנטי;
• הנחת חומצה חנקתית (0.5-1 מ"ל) במבחנה עם שכבות של אותה רמת שתן הנבדקת;
• הערכת התוצאה לאחר 2 דקות (הופעת טבעת דקה בגבול המדיום הנוזלי מעידה על נוכחות של 0.033% גופי חלבון).

התבוננות בטבעת דמוית חוט מחייבת דילול שתן במים ביחס של 1:1, הופעת טבעת עבה מצביעה על הצורך לערבב חלק מהשתן עם שלושה חלקים של מים, ובמקרה של טבעת קומפקטית, חלק מהשתן מדולל בשבע מנות של מים. יתר על כן, הדילול נמשך עד להופעת המשקע האופייני בדקה ה-2-3 של הבדיקה.

כמות החלבון הכלול מחושבת על ידי הכפלת 0.033% בערך הדילול. לדוגמה, אם השתן דולל פי 10, טבעת של גופי חלבון הופיעה בסוף הדקה השלישית של המחקר, ואז אחוז הכללת החלבון מחושב באופן הבא: 0.033x10=0.33.

אם אין משקעים, מוערכת מידת העכירות - עקבות עכירות בולטים, חלשים או בקושי ניתנים להבחנה.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

הפרשת חלבון בנס ג'ונס

בהתאם לסוג האימונוגלובולין המופרש, מבחינים בין:

• פתולוגיות של שרשרת קלה (הפרשת חלבון בנס ג'ונס);
• גלומרולופתיה (הפרשת אימונוגלובולינים אחרים).

שילובים שונים של נזק לכליות אפשריים גם כן. כפי שמראה בפועל, נפרופתיה היא תוצאה של פתולוגיה לימפופרוליפרטיבית (מיאלומה נפוצה, לוקמיה לימפוציטית כרונית, מחלת וולדנסטרום וכו').

כאשר הן משתחררות לזרם הדם, כמו כל החלבונים בעלי משקל מולקולרי של עד 40 kDa, שרשראות קלות עוקפות את המסנן הכלייתי, ואז מתפרקות לאוליגופפטידים וחומצות אמינו דרך ליזוזומים. עודף שרשראות קלות מעורר תפקוד לקוי של תגובת הקטבוליזם ושחרור אפשרי של אנזימים ליזוזומלים, מה שגורם לנמק של הרקמה הצינורית. גופי חלבון מובילים לחוסר יכולת לספיגה חוזרת, וכאשר שרשראות קלות חד שבטיות משתלבות עם חלבון Tamm-Horsfall, נוצרים גלילי חלבון בצינורות הדיסטליים.

חלבון בנס ג'ונס במחלת מיאלומה

מיאלומה נפוצה היא מצב פתולוגי שבו הגוף מייצר שרשראות אימונוגלובולינים קלות במקום שרשראות מלאות. אבחון המחלה ומעקב אחר המצב מתבצעים על ידי בדיקות מעבדה של שתן, המציגות את התכולה הכמותית של גופי חלבון. מפרט תת-סוג המיאלומה מבוסס על ניתוח סרום דם. סימנים קליניים של המחלה כוללים: תסמונת כאבי עצמות, הפרעה במתן שתן, המטומות ממקור לא ידוע, אצירת נוזלים בגוף.

חלבון בנס ג'ונס במיאלומה מתגלה על סמך בדיקות סטנדרטיות המראות את התכולה הכמותית של גופי חלבון ומעריכות את מידת הנזק הכלייתי. זיהוי החלבון בשתן מסביר את הנזק לאפיתל עם טרשת של הסטרומה הכלייתית, אשר עם הזמן יוצרת אי ספיקת כליות - גורם שכיח למוות כתוצאה מנזק למיאלומה (חלבון בנס ג'ונס סותם לחלוטין את הצינוריות, ומונע מתן שתן).

נתונים סטטיסטיים מצביעים על כך שמיאלומה מתמיינת אצל גברים מעל גיל 60, עם היסטוריה של נטייה גנטית, הסובלים מהשמנת יתר ודיכוי חיסוני, וכן לאחר שנחשפו לחומרים רעילים ורדיואקטיביים.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

קביעת חלבון בנס ג'ונס

כדי להבדיל חלבון ספציפי, מתבצע מחקר מעבדה של החלק הממוצע של שתן הבוקר (נדרש נפח של לפחות 50 מ"ל). נוכחות חלבון בנס-ג'ונס עם קביעת הרכיב הכמותי אפשרית בשיטת האימונופיקסציה. הפרדת חלבונים מתרחשת על ידי אלקטרופורזה ולאחר מכן אימונופיקסציה באמצעות סרומים מיוחדים. כאשר החלבון נקשר לנוגדנים של שרשראות קלות וכבדות של אימונוגלובולינים, נוצרים קומפלקסים חיסוניים, אשר מוערכים על ידי צביעה.

יש לציין כי אפילו ריכוז חלבון מינימלי מזוהה עקב תגובת משקעים לחומצה סולפוזליצילית. חלבון בנס-ג'ונס נקבע על ידי שילוב שתן מסונן (4 מ"ל) עם בופר אצטט (1 מ"ל). חימום לאחר מכן ל-60 מעלות צלזיוס באמבט מים והחזקה למשך 15 דקות עם דגימה חיובית מייצרים משקע אופייני. שיטה זו נחשבת לאמינה ביותר. סביבה חומצית או בסיסית יתר על המידה וצפיפות יחסית נמוכה של שתן עלולים להשפיע לרעה על תוצאות הניתוח.

שיטות מחקר בהן חלבון בנס-ג'ונס מומס על ידי חימום ל-100 מעלות צלזיוס או שוקע שוב לאחר קירור אינן אמינות, מכיוון שלא לכל יסודות החלבון יש את המאפיינים המתאימים. אך השימוש בנייר אינדיקטור אינו מתאים לחלוטין לגילוי חלבון בנס-ג'ונס.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]