שיטות אימונולוגיות לאבחון מחלות תורשתיות

לאחרונה, קומפלקס ההיסטוקומפטביליות העיקרי - HLA (אנטיגנים של לויקוציטים אנושיים) נחשב כסמן אימונולוגי חשוב בגנטיקה של אוכלוסיות. האנטיגנים של מערכת זו נקבעים באופן אימונולוגי בלויקוציטים בדם. קומפלקס הגנים HLA ממוקם בצורה קומפקטית על הזרוע הקצרה של כרומוזום 6 (6p21.3). מיקום מערכת זו והיקף המקומות שלה על הכרומוזום אפשרו לנו לחשב שהקומפלקס מהווה כ-1/1000 ממאגר הגנים של האורגניזם. אנטיגני היסטוקומפטביליות משתתפים בוויסות התגובה החיסונית של האורגניזם, בשמירה על הומאוסטזיס חיסוני. בשל הפולימורפיזם שלהם והמיקום הקומפקטי של אנטיגני HLA, הם צברו חשיבות רבה כסמן גנטי.

נכון לעכשיו, התגלו יותר מ-200 אללים של מערכת זו; זוהי הפולימורפית והמשמעותית ביותר מבחינה ביולוגית מבין המערכות הגנטיות של גוף האדם. הפרעות בתפקודים שונים של קומפלקס ההיסטוקומפטביליות העיקרי תורמות להתפתחות של מספר מחלות, בעיקר אוטואימוניות, אונקולוגיות וזיהומיות.

לפי מיקום קומפלקס HLA על כרומוזום 6, נבדלים הלוקוסים הבאים: D/DR, B, C, A. לוקוסים חדשים G, E, H, F התגלו יחסית לאחרונה; תפקידם הביולוגי נחקר כעת באופן פעיל. שלושה סוגים של אנטיגנים נבדלים בקומפלקס ההיסטוקומפטביליות העיקרי. אנטיגנים מסוג I מקודדים על ידי לוקוסים A, B, C. לוקוסים חדשים שייכים גם הם לסוג זה. אנטיגנים מסוג II מקודדים על ידי לוקוסים DR, DP, DQ, DN, DO. גנים מסוגים I ו-II מקודדים אנטיגני השתלה. גנים מסוג III מקודדים רכיבי משלים (C2, C4a, C4b, Bf), כמו גם סינתזה של איזופורמים של מספר אנזימים (פוספוגלוקומוטאז, גליקוקסילאז, פפסינוגן-5, 21-הידרוקסילאז).

נוכחותו של Ag הקשורה למחלה מסוימת אצל אדם מאפשרת לנו להניח נטייה מוגברת לפתולוגיה זו, ובקורלציות מסוימות, להיפך, עמידות לה.

קביעת אנטיגנים של מערכת HLA מתבצעת על לימפוציטים המבודדים מדם היקפי באמצעות סרום היסטוטיפינג בתגובה מיקרולימפוציטוטוקסית או שיטות גנטיות מולקולריות.

יצירת קשרים אסוציאטיביים בין מחלות לאנטיגן של קומפלקס ההיסטוקומפטביליות העיקרי מאפשרת:

• לזהות קבוצות הנמצאות בסיכון מוגבר לפתח את המחלה;
• לקבוע את הפולימורפיזם שלה, כלומר, לזהות קבוצות של חולים עם מאפיינים של מהלך המחלה או הפתוגנזה שלה; בהקשר זה, ניתן לבצע ניתוח של סינטרופיה של מחלות, תוך זיהוי התנאים הגנטיים המוקדמים לשילוב של צורות שונות של פתולוגיה; קשר עם אנטיגנים הקובעים עמידות למחלות מאפשר לזהות אנשים עם סיכון מופחת לפתח פתולוגיה זו;
• לבצע אבחון דיפרנציאלי של מחלות;
• לקבוע את הפרוגנוזה;
• לפתח טקטיקות טיפול אופטימליות.

מאחר שלרוב המחלות אין קשר ישיר לאנטיגנים של קומפלקס ההיסטוקומפטביליות העיקרי, הוצעה תיאוריית "שני הגנים" כדי להסביר את הקשר בין מחלות לאנטיגני HLA. על פי תיאוריה זו, קיים גן (גנים) לתגובה חיסונית (גן Ir) הקשור קשר הדוק לאנטיגני HLA ולגנים המווסתים את התגובה החיסונית. גנים מגנים קובעים עמידות למחלות, וגנים פרובוקטיביים קובעים רגישות למחלות מסוימות.

הסיכון היחסי למחלה עבור אנשים עם הגנוטיפ המתאים מחושב באמצעות הנוסחה: x = [h _p × (1 - h _c )] / [h _c × (1 - h _p )], כאשר h _p הוא שכיחות התכונה בחולים, ו- h _c הוא השכיחות באנשים בקבוצת הביקורת.

הסיכון היחסי מראה את גודל הקשר של המחלה עם Ag/Ag מסוים במערכת HLA (נותן מושג כמה גבוה יותר הסיכון לפתח את המחלה בנוכחות Ag בהשוואה להיעדרה). ככל שמדד זה גבוה יותר אצל חולה, כך הקשר האסוציאטיבי עם המחלה גבוה יותר.

קשר בין מחלות אנושיות ל-HLA-Ag (תדירות גנים,%)

מחלות	HLA	קבוצת ביקורת,%	חוֹלֶה,%	סיכון יחסי
ראומטולוגיה
ספונדיליטיס מקשחת	ב27	5-7	90-93	90-150
תסמונת רייטר	ב27	6-9	69-76	32-49.6
דלקת פרקים הנגרמת מזיהומים:
- ירסיניה	ב27		58-76	17.59
סלמונלה	ב27		60-69	17.57
דלקת מפרקים פסוריאטית	B13		9-37	4.79
דלקת מפרקים שגרונית	Dw4	12-19	48-72	3.9-12.0
	DR4	20-32	70	4.9-9.33
תסמונת בכצ'ט	B5	13	48-86	7.4-16.4
SKV	B5		11-34	1.83
	B8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26.4	57.1	3.80
	DR3	22.2	46.4	2.90
תסמונת גוגרוט-סיוגרן	B8		38-58	3.15
	Dw3	26	69-87	19.0
קרדיולוגיה
IHD	B7	27.8	45.8	2.19
	B14	7.5	14.8	2.14
	B15	11.1	20.4	2.05
	Cw4	18.7	32.8	2.12
לַחַץ יֶתֶר	B18	10.4	22.6	2.52
	Aw19	12.6	28.3	2.74
אנדוקרינולוגיה
סוכרת מסוג 1	B8	32	52-55	2.1-2.5
	B18		5-59	1.65
	B15	12	18-36	1.89-3.9
	Dw3	26	48-50	2.9-3.8
	Dw4	19	42-49	3.5-3.9
	DR3 DR3/DR4	20	60	6.10 33
היפרפעילות של בלוטת התריס	B8	21	35-49	2.34-3.5
	ד3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
דלקת בלוטת התריס הסאב-אקוטית (דה קרבן)	BW35	13	63-73	16.81
	Dw1		33	2.1
מחלת אדיסון	B8		20-80	3.88-6.4
	Dw3	26	70-76	8.8-10.5
תסמונת איטסנקו-קושינג	א1		49	2.45
גסטרואנטרולוגיה
אנמיה מזיקה	B7	19	26-52	1.7-3.1
	DR5	6	25	5.20
דלקת קיבה אטרופית	B7		37	2.55
כיב פפטי של התריסריון	A2	48.1	61.3	1.7
	A10	20.6	63.3	6.65
	B14	4.0	10.3	2.76
	B15	6.6	24.4	4.56
	B40	9.72	23.3	2.82
דלקת כבד אוטואימונית	B8	16	37-68	2.8-4.1
	DR4	24	71	7.75
נשאים של HBsAg	Bw41		12	11.16
	B15		10-19	0.29

מחלות	HLA	קבוצת ביקורת,%	חוֹלֶה,%	סיכון יחסי
דֶרמָטוֹלוֹגִיָה
סַפַּחַת	Bw17	6-8	22-36	3.8-6.4
	B13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Bw16	5	15	2.9
דרמטיטיס הרפטיפורמיס	B8	27-29	62-63	4.00-4.6
	DR3	19	80	16.60
סקלרודרמה	B7	24	35	1.7
בּוּעֶנֶת	A10			3.1
דלקת עור אטופית	B13	6.86	21.28	3.67
	ב27	9.94	25.53	3.11
	A10/B13	0.88	8.51	10.48
אֶקזֵמָה	A10	19.64	36.67	2.37
	ב27	9.94	26.67	3.29
אורטיקריה ובצקת קווינקה	B13	6.86	21,21	3.65
	B5.8	1.42	12,12	9.57
	B5.35	0.71	6.06	9.02
נוירולוגיה
טרשת נפוצה	A3	25	36-37	2.7-2.8
	B7	25-33	36-42	1.4-2.0
	Dw2	16-26	60-70	4.3-12.2
	DR2	35	51.2	1.95
	DR3	20	32.5	1.93
מיאסטניה	B8	21-24	52-57	3.4-5.0
	א1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2.5
פולמונולוגיה
אסתמה ברונכיאלית (בחולים בגילאי 19-30 שנים)	B21	4.62	12.5	2.95
	ב22	9.94	19.64	2.22
	ב27	12.31	37.5	4.27
	B35	0.11	5.36	51.4
	B27/35	0.47	7.14	16.2
מחלות אחרות
נזלת וזומוטורית	A3	26.98	52.38	2.98
	B17	7.57	28.57	4.88
	A3/10	2.72	23.83	11.18
	B7/17	0.47	9.52	22.28

הנתונים המוצגים בטבלה מראים כי הקשרים האסוציאטיביים החזקים ביותר נמצאים עבור מחלות בעלות סוג תורשה פוליגני או רב-פקטוריאלי.

לפיכך, קביעת אנטיגנים של קומפלקס ההיסטוקומפטביליות העיקרי על גבי תאי דם (לויקוציטים) מאפשרת לנו לזהות את מידת הנטייה האישית של אדם למחלה מסוימת, ובמקרים מסוימים להשתמש בתוצאות המחקר לצורך אבחון דיפרנציאלי, הערכת פרוגנוזה ובחירת טקטיקות טיפול. לדוגמה, גילוי אנטיגנים HLA-B27 משמש באבחון דיפרנציאלי של מחלות אוטואימוניות. הוא מזוהה ב-90-93% מהחולים מהגזע הקווקזי עם דלקת חוליות מקשחת ותסמונת רייטר. אצל נציגים בריאים מגזע זה, אנטיגנים HLA-B27 מזוהים רק ב-5-7% מהמקרים. אנטיגנים HLA-B27 מזוהים לעיתים קרובות בדלקת מפרקים פסוריאטית, מחלות מעי דלקתיות כרוניות המופיעות עם דלקת סקרואילי ודלקת חוליות, דלקת ענביה ודלקת מפרקים תגובתית.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]