ברוצלה

ברוצלוזיס היא מחלה זיהומית ייחודית של בני אדם ובעלי חיים הנגרמת על ידי חיידקים מהסוג Brucella. ברוסיה נרשמים מדי שנה כ-500 מקרים ראשוניים של ברוצלוזיס בבני אדם.

אנשים נדבקים בברוסלוזיס בעיקר מבעלי חיים מבויתים (כבשים, עיזים, פרות, חזירים, איילים - המאגר העיקרי של הפתוגן בטבע). ברוסלוזיס קיימת זמן רב ותוארה תחת שמות שנקבעו על פי תפוצתה הגיאוגרפית (מלטזית, נפוליטנית, גיברלטר, קדחת ים תיכונית).

הפתוגן התגלה בשנת 1886 על ידי ד. ברוס, שמצא אותו בתכשיר מטחול של חייל שמת מקדחת מלטה, וקרא לו המיקרוקוקוס המלטזי - Micrococcus melitensis. נקבע כי הנשאים העיקריים שלו הם עיזים וכבשים, וההדבקה מתרחשת בעת צריכת חלב נא מהם. בשנת 1897, ב. בנג וב. סטריבולט גילו את הפתוגן של הפלה זיהומית בפרות - Bacterium abortus bovis, ובשנת 1914, ג'. טראום גילה את הפתוגן של הפלה זיהומית בחזירים - Brucella abortus suis. מחקר השוואתי של תכונותיהם של Brucella melitensis ו-Brucella abortus bovis שנערך בשנים 1916-1918 על ידי א. אייונס הראה כי הם כמעט בלתי ניתנים להבחנה זה מזה בתכונות רבות. בהקשר זה, הוצע לאחד אותם לקבוצה אחת, הקרויה לכבוד ברוס - Brucella. בשנת 1929, I. Heddleson כלל את Brucella abortus suis בקבוצה זו והציע לחלק את הסוג Brucella ל-3 מינים: Brucella melitensis (Micrococcus melitensis), Brucella abortus (Brucella abortus bovis) ו-Brucella suis (Brucella abortus suis).

מחלת בני אדם ובעלי חיים הנגרמת על ידי ברוצלה הוחלט להיקרא ברוצלוזיס. לאחר מכן, הסוג Brucella נוסף בשלושה מינים נוספים: Brucella ovis בודדה מאילים הסובלים מאפידידימיטיס (1953), Brucella neotomae - מחולדות שיח (1957) ו-Brucella canis - מכלבי ציד (1966). על פי הסיווג של ברג'י (2001), ברוצלה שייכת לסוג Alphaproteobacteria.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

מורפולוגיה של ברוצלה

לברוסלה תכונות מורפולוגיות, טינקטוריאליות ותרבותיות דומות. מדובר בתאי קוקואיד קטנים שליליים גראם בקוטר של 0.5-0.7 מיקרומטר ואורך של 0.6-1.5 מיקרומטר, הממוקמים באופן אקראי, לפעמים בזוגות, ללא שוטונים, אינם יוצרים נבגים וקפסולות. תכולת ה-G + C ב-DNA היא 56-58 מול %.

תכונות ביוכימיות של ברוצלה

ברוצלה היא אירובית או מיקרואארופילית, אינה גדלה בתנאים אנאירוביים. הטמפרטורה האופטימלית לגדילה היא 36-37 מעלות צלזיוס; pH 7.0-7.2; גדלה היטב על מצע תזונתי קונבנציונלי, אך עדיף בתוספת של סרום או דם. מצע מומלץ: אגר תזונתי עם תוספת של סרום (5%) וגלוקוז; אגר שהוכן על חליטת תפוחי אדמה, עם תוספת של 5% סרום; אגר דם; ציר בשר-פפטון. מאפיין של ברוצלה אבורטוס הוא הצורך שלה בתכולה מוגברת של CO2 (5-10%) באטמוספרת הגדילה. גדילה איטית אופיינית מאוד לברוצלה, במיוחד בדורות הראשונים: כאשר נזרעים מבני אדם ובעלי חיים, הגדילה מופיעה לעיתים לאחר 2-4 שבועות. מושבות ברוצלה חסרות צבע, קמורות, עגולות - בצורת S, או מחוספסות - בצורת R, עדינות ושקופות בהתחלה, והופכות עכורות עם הגיל.

מושבות של Brucella canis, Brucella ovis והביוטיפ החמישי Brucella suis תמיד בעלות צורת R. גידול Brucella במצע הציר מלווה בעכירות אחידה. תיאמין, ביוטין וניאצין נחוצים לגידול Brucella. Brucella מתסיסה גלוקוז וארבינוז עם היווצרות חומצה ללא גז, אינה יוצרת אינדול, ומפחיתה ניטרטים לניטריטים. היווצרות מימן גופרתי בולטת ביותר ב-Brucella suis.

בסך הכל, זוהו 10-14 מקטעי אנטיגן בברוסלה באמצעות אימונואלקטרופורזה של תמציות שהוכנו מתאים שנהרסו על ידי אולטרסאונד. לברוסלה יש אנטיגן ספציפי לסוג משותף, אנטיגנים סומטיים שונים אחרים, כולל M ספציפי למין (דומיננטי ב-Brucella melitensis), A (דומיננטי ב-Brucella abortus) ו-R (בצורות גסות). אנטיגנים M ו-A מזוהים גם במינים אחרים (ביו-ווארים) של ברוסלה, אך בפרופורציות שונות, שיש לקחת בחשבון בעת זיהוים. זוהו אנטיגנים המשותפים ל-Francisella tularensis, Bordetella bronchiseptica ו-Y. enterocolitica (סרוטיפ 09). בשל העובדה שחלק מהמאפיינים של הברוסלה משתנים, המין Brucella melitensis מחולק ל-3 ביו-ווארים, המין Brucella abortus - ל-9 ו-B. suis - ל-5 ביו-ווארים. לצורך בידולם למינים וביוטיפים ולזיהוים, נעשה שימוש במכלול של מאפיינים, הכולל, בנוסף לתכונות מורפולוגיות וצביעה, גם את הצורך ב-CO2 לגדילה, את היכולת לגדול על מצע בנוכחות צבעים מסוימים (פוקסין בסיסי, תיונין, ספרנין), להפריש H2S, ליצור אוראז, פוספטאז, קטלאז (פעילותם של אנזימים אלה מתבטאת בצורה החזקה ביותר ב-Brucella suis, הם אינם גדלים על מצע עם ספרנין), רגישות לבקטריופאג' טביליסי, התלכדות עם סרומים חד-ספציפיים. במידת הצורך, נעשה שימוש בבדיקות מטבוליות נוספות: היכולת לחמצן חומצות אמינו מסוימות (אלנין, אספרגין, חומצה גלוטמית, אורניטין, ציטרולין, ארגינין, ליזין) ופחמימות (אראבינוז, גלקטוז, ריבוז, D-גלוקוז, D-אריתריטול, D-קסילוז).

הביוור הרביעי הוא Brucella suis, מכיוון שהנשא העיקרי שלו אינו חזירים, אלא איילים, ובהתחשב בתכונותיו האחרות, מומלץ להבחין בו כמין עצמאי, Brucella rangiferis.

הביוור החמישי B. suis כולל תרבויות שבודדו מפרות וכבשים שהופלו ומכילות צורת R יציבה של ברוסלה.

פאג' מברוסלה לטביליסי: בדילול העבודה הרגיל, הפאג' מפריך רק את B. abortus. עם זאת, במינון השווה לעשרה דילולים עבודה, הפאג' מפריך, אם כי בחלשות, זנים של Brucella suis ו-Brucella neotomae.

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

עמידות לברוסלה

ברוסלה עמידה יחסית בסביבה. היא שורדת באדמה לחה ובמים עד 2-3 חודשים, ובטמפרטורה של 11-13 מעלות צלזיוס - עד 4.5 חודשים; במים עומדים - עד 3 חודשים; בחלב - עד 273 ימים; בחמאה - עד 142 ימים; בגבינה - עד שנה; בגבינת פטה - עד 72 ימים; בחלב חמוץ - עד 30 ימים; בקפיר - עד 11 ימים. עם זאת, היא רגישה מאוד לטמפרטורות גבוהות - ב-70 מעלות צלזיוס היא מתה לאחר 10 דקות, וברתיחה - תוך מספר שניות. פסטור חלב ב-80-90 מעלות צלזיוס גורם למותה לאחר 5 דקות. ברוסלה רגישה גם לחומרי חיטוי כימיים שונים.

גורמי פתוגניות של ברוצלה

ברוצלה אינה יוצרת אקסוטוקסין. הפתוגניות שלה נובעת מאנדוטוקסין ומיכולתה לדכא פגוציטוזה, ולמנוע "התפרצות חמצונית". גורמים ספציפיים המדכאים פגוציטוזה לא נחקרו מספיק. הפתוגניות של ברוצלה קשורה גם להיאלורונידאז ולאנזימים אחרים. חיוני שברוצלה תהיה תכונה אלרגנית חזקה מאוד, הקובעת במידה רבה את הפתוגנזה והתמונה הקלינית של ברוצלה.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ]

חסינות לאחר זיהום

חסינות לאחר זיהום היא ארוכת טווח וחזקה, אך מחלות חוזרות ונשנות אפשריות. החסינות היא מקושרת (נגד כל סוגי הברוצלה) ונגרמת על ידי לימפוציטים מסוג T ומקרופאגים. אצל אנשים ובעלי חיים חסינים, פגוציטוזה מלאה. תפקידם של נוגדנים בחסינות הוא לעורר פעילות פגוציטית. תגובה אלרגית חיובית מצביעה לא רק על רגישות של הגוף, אלא גם על נוכחות חסינות. פריצת דרך בחסינות יכולה להתרחש עם זיהום על ידי מינונים גדולים של הפתוגן או עם ארסיות גבוהה שלו.

אפידמיולוגיה של ברוצלוזיס

הנשאים העיקריים של ברוצלוזיס הם כבשים, עיזים (Brucella melitensis), בקר (Brucella abortus), חזירים (Brucella suis) ואיילים (Brucella rangiferis). עם זאת, הם יכולים להתפשט גם למינים רבים אחרים של בעלי חיים (יאקים, גמלים, תאו, זאבים, שועלים, מכרסמים, לאמות, סאיגה, ביזונים, סוסים, ארנבות, קיפודים, תרנגולות וכו'). המעבר של Brucella melitensis לבקר מסוכן במיוחד, שכן במקרה זה היא שומרת על פתוגניות גבוהה עבור בני אדם. מבין כל המינים, הפתוגני ביותר עבור בני אדם בארצנו הוא Brucella melitensis. הוא גורם למחלות בבני אדם ביותר מ-95-97% מכלל מקרי הברוצלוזיס. Brucella abortus, ככלל, גורם לצורה סמויה של המחלה, וביטויים קליניים נצפים רק ב-1-3%. Brucella suis גורם למחלה בתדירות נמוכה אף יותר (פחות מ-1%). הפתוגניות של ברוצלוזיס משתנה לא רק בהתאם למין, אלא גם בהתאם לביו-זן. בפרט, הביו-וארס 3, 6, 7, 9 של Brucella abortus אינם נחותים באלרנסיותם מ-Brucella melitensis. וריאנטים אמריקאיים של Brucella suis גם הם אלימים מאוד, לכן, התפקיד האטיולוגי של מינים בודדים של ברוצלוזיס מתבטא באופן שונה במדינות שונות. לדוגמה, במקסיקו, התפקיד העיקרי באפידמיולוגיה של ברוצלוזיס ממלא Brucella melitensis, בארה"ב - Brucella suis, ובקנדה ובכמה מדינות אירופאיות - Brucella abortus. ייתכן שהביו-וארס 3, 6, 7, 9 של Brucella abortus נוצרו כתוצאה מהגירה של Brucella melitensis לבקר והטרנספורמציה שלה.

בבעלי חיים, ברוצלוזיס מתרחשת כמחלה כללית, שתמונתה יכולה להיות שונה. עבור בקר גדול וקטן, הביטויים האופייניים ביותר של המחלה הם הפלות זיהומיות, במיוחד אם הן המוניות. בחזירים, הפלות שכיחות פחות, המחלה מתרחשת כספסיס כרוני עם נזק למפרקים, אשכים ואיברים אחרים. מבעלי חיים חולים, הפתוגן מופרש עם חלב, שתן, צואה, מוגלה ובמיוחד בשפע - במהלך תקופת ההפלה עם העובר, קרומי מי השפיר והפרשות מתעלת הלידה, שהם החומר המדבק ביותר. רבייה שופעת של ברוצלות בקרומי העובר קשורה לנוכחות של אלכוהול רב-הידרי - אריתריטול, המשמש כגורם גדילה חשוב עבור ברונלה מכל המינים, למעט ברוצלה אוביס.

אדם נדבק מבעלי חיים (במקרים נדירים מאוד מאדם חולה) בעיקר במגע או באמצעי מגע ביתי (80-90% מכלל המחלות). שיטת ההדבקה התזונתית נצפית בעיקר בעת צריכת חלב לא מפוסטר מבעלי חיים חולים או מוצרי חלב המוכנים ממנו, וכן מים. כל האנשים העוסקים באופן קבוע או זמני בבעלי חיים או בחומרי גלם מן החי עקב מקצועם (רועי צאן, בקר, חולבות, עובדים וטרינרים ואחרים) עלולים להידבק במגע או באמצעי מגע ביתי. ברוסלה חודרת לגוף האדם דרך העור או, לעתים קרובות הרבה יותר, דרך ריריות הפה, האף והעיניים (המובאות על ידי ידיים מלוכלכות).

[ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ]

תסמינים של ברוצלוזיס

תקופת הדגירה של ברוצלוזיס משתנה בין שבוע למספר חודשים.

הפתוגן חודר לבלוטות הלימפה דרך דרכי הלימפה; לאחר התרבותו, הוא יוצר "קומפלקס ברוצלוזיס ראשוני", שמיקומו תלוי במיקום שער הכניסה, אך לרוב מדובר במנגנון הלימפה של חלל הפה, בלוטות הרטרופריינגיאליות, צוואריות, תת-לסתיות ומנגנון הלימפה של המעי. מבלוטות הלימפה, הפתוגן חודר לדם ומתפשט בכל הגוף, ומשפיע באופן סלקטיבי על רקמות המערכת הלימפומהמטופויאטית. בקטרימיה והכללה של התהליך מובילות לאלרגיות חמורות של הגוף. ברוצלוזיס מתרחשת כספסיס כרוני. זאת בשל אופייה הלא שלם של פגוציטוזה. בהיותם ומתרבים בתוך תאים, כולל פגוציטים, ברוצלות אינן נגישות לנוגדנים או לתרופות כימותרפיות. בנוסף, הן יכולות להפוך לצורות L בתוך התאים ובצורה זו להישאר בגוף במשך זמן רב, וחזרתן לצורתן המקורית גורמת להישנות המחלה.

תסמיני הברוצלוזיס מגוונים ומורכבים מאוד. הם תלויים בעיקר באלרגיה ובשיכרון של הגוף ובאילו איברים ורקמות מעורבים בתהליך הזיהומי. לרוב, נפגעות מערכות הלימפה, כלי הדם, הכבד והטחול, העצבים, ובמיוחד השרירים והשלד. ברוסלוזיס מאופיינת במהלך ארוך טווח (לפעמים עד 10 חודשים), במקרים חמורים היא עלולה להוביל לאובדן כושר עבודה לטווח ארוך ולנכות זמנית, אך עדיין המחלה, ככלל, מסתיימת בהחלמה מלאה.

אבחון מעבדתי של ברוצלוזיס

ברוצלוזיס מאובחנת באמצעות בדיקה ביולוגית, שיטה בקטריולוגית, תגובות סרולוגיות, מבחן אלרגי ברנט ושיטת הכלאה DNA-DNA. החומר למחקר הוא דם, מח עצם, הפרשת לחמית, שתן, חלב אם (אצל אמהות מניקות), בתדירות נמוכה יותר - צואה, נוזל פריארטיקולרי. מכיוון שמקום המגורים העיקרי של הפתוגן בגוף הם תאים של מערכות המו- או לימפופויאטיות, יש לתת עדיפות לבידוד המו- או מיאלוקולטורה. במחקר בקטריולוגי, יש צורך לספק תנאים לגדילת Brucella abortus (צורך ב-CO2). זיהוי תרביות ברוצלה מבודדות מתבצע על סמך הסימנים המפורטים בטבלה 30. בדיקה ביולוגית (זיהום של שרקנים) נלקחת במקרים בהם החומר מזוהם מאוד במיקרופלורה זרה וקשה להשיג תרבית טהורה של הפתוגן ישירות ממנו. ניתן להשתמש בתגובות סרולוגיות או כדי לזהות אנטיגנים של הפתוגן או כדי לזהות נוגדנים אליו. כדי לזהות אנטיגנים של ברוצלוזיס שיכולים להסתובב בדם בצורה חופשית או בצורה של קומפלקסים של אנטיגן + נוגדנים (CIC - קומפלקסים חיסוניים במחזור), משתמשים בתגובות הבאות: RPGA (במיוחד באמצעות אבחון אריתרוציטים עם נוגדנים חד שבטיים לאנטיגן הספציפי לסוג של Brucella); תגובת המגלוטינציה אגרגטבית (AGR); אריתרוציטים נושאים נוגדנים לאנטיגנים של ברוצלוזיס; תגובות קרישה, משקיעה ו-IFM. כדי לזהות נוגדנים בסרום של המטופל, משתמשים בתגובות הבאות: תגובת אגלוטינציה רייט, תגובת קומבס (לגילוי נוגדנים לא שלמים), תגובת אימונופלואורסצנציה עקיפה, RPGA, IFM, RSK, OFR, וכן תגובות מואצות על זכוכית: Heddleson, Rose Bengal, אגלוטינציה של לטקס, תגובת המוליזה עקיפה (אריתרוציטים רגישים עם Brucella LPS עוברים ליזיס בנוכחות נוגדנים ומשלים).

כיצד למנוע ברוצלוזיס?

חיסון לברוצלוזיס הוא טיפול מונע ספציפי לברוצלוזיס. החיסון מתבצע באמצעות חיסון חי המוכן מזן B. abortus (חיסון לברוצלוזיס חי - LBB), רק במוקדים של ברוצלוזיס של עיזים וכבשים. החיסון מורח עורית, פעם אחת. חיסון חוזר מתבצע רק עבור אנשים עם תוצאה שלילית במבחן ברנט ותגובות סרולוגיות. מכיוון של-LBB יש השפעה אלרגנית חזקה, הוצע במקום זאת חיסון כימי לברוצלוזיס (CBV) המוכן מאנטיגנים של דופן התא של ברוצלה. יש לו אימונוגניות גבוהה, אך הוא פחות אלרגני. ניתן להשתמש בתרחיף של ברוצלות מומתות (חיסון טיפולי מומת) או LBB לטיפול בברוצלוזיס כרונית (לעורר היווצרות חסינות לאחר הדבקה).