^

בריאות

A
A
A

אבחון הרפס

 
, עורך רפואי
סקירה אחרונה: 07.07.2025
 
Fact-checked
х

כל תוכן iLive נבדק מבחינה רפואית או נבדק למעשה כדי להבטיח דיוק עובדתי רב ככל האפשר.

יש לנו קווים מנחים קפדניים המקור רק קישור לאתרים מדיה מכובד, מוסדות מחקר אקדמי, בכל עת אפשרי, עמיתים מבחינה רפואית מחקרים. שים לב שהמספרים בסוגריים ([1], [2] וכו ') הם קישורים הניתנים ללחיצה למחקרים אלה.

אם אתה סבור שתוכן כלשהו שלנו אינו מדויק, לא עדכני או מפוקפק אחרת, בחר אותו ולחץ על Ctrl + Enter.

אבחון הרפס מבוסס על בידוד קלאסי של הנגיף בתרביות תאים רגישות, שיטות אימונופלואורסצנציה וסרולוגיה, בדיקה קולפוסקופית ושימוש בשיטות ביולוגיות מולקולריות מודרניות (PCR, הכלאה נקודתית), המאפשרות לאבחן את כל קבוצת נגיפי ההרפס, כולל סוגי HHV-6 ו-HHV-7.

שיטות אבחון מעבדתיות לזיהום הרפס

השיטות העיקריות שמטרתן בידוד HSV או גילוי חלקיקי נגיף ו/או מרכיביהם

שיטות עזר שמטרתן לזהות נוגדנים ל-HSV בנוזלים ביולוגיים של גוף האדם

  1. בידוד HSV בתרביות תאים ובעלי חיים רגישות
  2. מיקרוסקופ אלקטרונים ישיר וחיסוני
  3. וריאציות ישירות ועקיפות של IPA
  4. IFA
  5. שיטות ביולוגיות מולקולריות
  6. תגובת אגלוטינציה של לטקס
  1. תגובת ניטרול
  2. RSC
  3. קביעת נוגדנים לחלבונים לא מבניים של HSV-1,2

הוכח כי ב-76% מהחולים הרפס גניטלי (GH) נגרם על ידי HSV-2, וב-24% - על ידי HSV-1. יתר על כן, GH כזיהום יחיד התרחש רק ב-22% מהחולים, ב-78% מהמקרים זוהו קשרים מיקרוביאליים. ב-46% מהנבדקים זוהתה טפיליות הנגרמות על ידי שני פתוגנים, כולל כלמידיה זוהתה ב-40% מהמקרים. גרדנרלה, טריכומונס וגונוקוקים זוהו בתדירות נמוכה יותר במריחות.

ב-27% מהחולים, הטפילים אובחנו על ידי שלושה פתוגנים, ב-5.2% - על ידי ארבעה פתוגנים. יתר על כן, לרוב צוין שילוב של כלמידיה עם גרדנרלה וקנדידה. נתונים אלה מאששים את הצורך בבדיקה בקטריולוגית יסודית של חולים עם הורמון גדילה על מנת לזהות שילובים של גורמים פתוגניים, כמו גם מחקר מעמיק של הפתוגנזה של זיהומים מעורבים של מערכת השתן והאיברי המין, שיאפשר טיפול מורכב מובחן בזיהום הרפס.

חומרים שנחקרו לבידוד HSV בהתאם למיקום הנגעים ההרפטיים

לוקליזציה
של נגעים


תוכן שלפוחית

גירוד תאים

נוזל שדרתי (CSF)

שאיבת סימפונות

בִּיוֹפְּסִיָה

דָם

1

2

3

4

עוֹר

+

+

עיניים

+

+

אֵיבְרֵי הַמִין

+

+

פִּי הַטַבַּעַת

+

+

+

פֶּה

+

+

+

מערכת העצבים המרכזית

+

+

+

+

ריאות

+

+

+

כָּבֵד

+

+


הרפס מולד

+

+

+

+

+

שיטות אבחון מעבדתיות של זיהום ציטומגלווירוס

שיטות

הזמן הנדרש להשגת תוצאות

הערות

וירולוגי

מיקרוסקופ אלקטרונים

3 שעות

לא מאוד נגיש

בידוד וירוסים בתרבית תאים (VCI)

4-20 ימים

סטנדרטי,
איטי

צביעת אימונופלואורסצנציה של AG מוקדם באמצעות נוגדנים חד שבטיים

6 שעות

פחות
ספציפי

ציטולוגי

2-3 שעות

פחות
ספציפי

סרולוגי

RSC

יומיים

תֶקֶן

RGA

יום אחד

עתיר עבודה

שׁוּנִית

6 שעות

פשוט,
ספציפי

NRIF

6 שעות

קָשֶׁה

RIMP

6 שעות

קָשֶׁה

ELISA (IgM, DO)

6 שעות

מהיר, פשוט

אימונובלוט

6 שעות

יָקָר

ביולוגי מולקולרי

MG

5-7 ימים

יקר,
עתיר עבודה

PCR

3 שעות

יָקָר

שיטות אבחון של נגיף הרפס זוסטר


שיטות אבחון


טכניקות מעבדה

עָקִיף

בְּחִירָה

תרבית רקמה, עוברי עוף, חיות מעבדה, תרבית משותפת עם תאים מתירניים או וירוסי עזר

זיהוי של מבודדים

תגובת ניטרול, RSC, IF, PIEF, תגובת משקעים של בודדים, אגלוטינציה, IF

יָשִׁיר

ציטולוגיה

מריחות: אימונופלואורסצנציה צבעונית

היסטולוגיה

פתומורפולוגיה של התא

מִבְנֶה

מיקרוסקופיה עוברית, מיקרוסקופיה אימונואלקטרונית

קביעת אנטיגנים

אם, פיף, רים, IFA

קביעת ייצור נוגדנים מקומי

Ig M, Ig G, Ig A: ELISA, RIA

גישות ביולוגיות מולקולריות

הכלאה מולקולרית, PCR

אבחון מעבדתי של זיהום הנגרם על ידי נגיף הרפס זוסטר


בעיות אבחון

שיטות

תוצאות צפויות

זיהום ראשוני חריף

1

גילוי תוך שעתיים

2

רמות הנוגדנים עולות באיטיות

3

מופיע 3 ימים לאחר ההדבקה

זיהום
חוזר
חריף

1

גילוי UUU לאחר שעתיים

2

רמות הנוגדנים עולות באיטיות

4

מופיע 4 ימים לאחר הופעת הפריחה

  1. קביעת שלפוחיות של VEGF בנוזל;
  2. סרולוגיה: CSC, ELISA, שמטרתן גילוי
  3. סרולוגיה: ELISA שמטרתו לזהות IgM;
  4. סרולוגיה: ELISA שמטרתה לזהות IgA, IgM.

שיטות להצביע על התגובה החיסונית לזיהום בנגיף הרפס זוסטר

גִישָׁה

שִׁיטָה

גילוי עלייה בטיטר נוגדנים בסרום השני

RSK, RTGA, RPGA, תגובת ניטרול IF, RIM, ELISA

גילוי נוגדנים ספציפיים לסוג Ig G ו-Ig A בדגימת הסרום הראשונה

ELISA, IF, RIM, אגלוטינציה של לטקס

פירוש תוצאות הבדיקה הסרולוגית של סרום המטופלים לזיהומי הרפס-וירוס (ELISA)

שם
הזיהום/סמן

ערכי סף ממוצעים לזיהומים

תוצאות הניתוח

פֵּשֶׁר

ציטומגליה אנטי-CMV IgG (1-20 יחידות/מ"ל)

IgM אנטי-CMV (100-300%)

חיובי 1-6 חיובי 6-10 חיובי >10
שלילי
חיובי 100-300 שלילי <90 בספק 90-100

הפוגה החמרה
של המחלה
שלב אקוטי של המחלה
ללא זיהום (מחלה)
שלב אקוטי של המחלה
חזור על הניתוח לאחר 2-3 שבועות

סרוטיפים של הרפס סימפלקס 1,2
אנטי-HSV 1/2 סך הכל (100-900%)

חיובי 100-400 חיובי 400-800 חיובי >800
שלילי <100

הפוגה
, החמרה של המחלה,
שלב אקוטי של המחלה,
ללא זיהום (מחלה).

הטבלה מציגה את השיטות העיקריות לאבחון מעבדתי של זיהומי הרפס-וירוס, וכן חומרים ביולוגיים מומלצים הנבדקים בעת בידוד HSV, תוך התחשבות בלוקליזציה של נגעים הרפטיים.

בידוד אמין של נגיפי הרפס סימפלקס ו-CMV על ידי הדבקה בתרביות תאים רגישות. לפיכך, במהלך בדיקה וירולוגית של 26 חולים במהלך תקופת ההישנות, בודד HSV בתרבית תאי Vero רגישה ב-23 מקרים (88.4%). תרביות נגועות הראו תמונה של פעולה ציטופתית אופיינית ל-HSV - היווצרות תאי ענק מרובי גרעינים או הצטברות של תאים מעוגלים ומוגדלים בצורת אשכולות. ב-52.1% מהמקרים, מוקדי פעולה ציטופתית של הנגיף ניתן היה לזהות כבר 16-24 שעות לאחר ההדבקה. עד 48-72 שעות של דגירה בתרביות נגועות, אחוז החומרים הגורמים להרס ספציפי של תאים עלה ל-87%. ורק ב-13% מהמקרים זוהו תוצאות חיוביות 96 שעות לאחר ההדבקה או יותר או במהלך מעבר חוזר.

שיטות אבחון מעבדתיות של זיהום הרפס כללי

השיטות העיקריות שמטרתן לזהות (בידוד) נגיפי הרפס, חלקיקיהם ומרכיביהם

שיטות עזר שמטרתן גילוי נוגדנים לנגיפי הרפס בנוזלים ביולוגיים, גילוי שינויים אנזימטיים בסרום הדם

בידוד נגיפי הרפס על תרביות תאים ובעלי חיים רגישות.
מיקרוסקופ אלקטרונים ישיר וחיסוני.
וריאנטים ישירים ועקיפים של שיטת האימונופראוקסידאז. וריאנטים ישירים ועקיפים של שיטת הנוגדנים הפלואורסצנטיים.
וריאנטים של אימונו-אסאי אנזים בפאזה מוצקה.
וריאנטים של שיטת ההכלאה המולקולרית (DNA-DNA).
תגובת שרשרת פולימראזית.
תגובת אגלוטינציה של לטקס.

מבחן ניטרול
מבחן קיבוע משלים
מבחן אגלוטינציה של לטקס
גרסה עקיפה של שיטת הנוגדנים הפלואורסצנטיים
גרסה עקיפה של שיטת האימונופראוקסידאז
גרסאות של אימונו-אסאי אנזים בפאזה מוצקה
שיטת סופג חיסוני
שיטת קיבוע משלים רדיאלי
קביעת רמות אלנין ואספרטט אמינוטרנספראז

שיטות סרולוגיות משמשות לאבחון מונונוקלאוזיס זיהומית (זיהום הנגרם על ידי EBV). תגובת פול-בונל עם תאי דם אדומים של ראם, טיטר אבחוני של 1:28 ומעלה בבדיקת סרום דם יחידה, או עלייה פי 4 בנוגדנים בעת בדיקת סרומים מזווגים. נעשה שימוש בתגובת הוף-באואר עם תרחיף 4% של תאי דם אדומים של סוס שעברו פורמלין. התוצאה נלקחת בחשבון לאחר 2 דקות; במונונוקלאוזיס זיהומית, התגובה ספציפית ביותר.

כיום מפותחת שיטת אימונו-אסאי אנזימים (EIA) לאבחון מונונוקלאוזיס זיהומית. במקרה זה, נוגדנים מסוג IgG ו-IgM בסרום של המטופל נקבעים על ידי דגירה עם לימפובלסטים נגועים ב-EBV, ולאחר מכן טיפול בנוגדנים פלואורסצנטיים. בתקופה האקוטית של המחלה, נוגדנים לאנטיגן הקפסיד הוויראלי נקבעים בטיטר של 1:160 ומעלה.

בעת שימוש במספר מערכות בדיקה מסחריות מיובאות, ELISA יכולה לזהות: נוגדנים לנוגדני מעטפת EBV, נוגדנים לאנטיגן מוקדם של EBV, סך הנוגדנים לאנטיגן מוקדם של EBV, שנקבעו בשלב האקוטי של המחלה הן בגרעין התא והן בציטופלזמה של התא, ונוגדנים מוגבלים לאנטיגן מוקדם של EBV, שנקבעו בשלב האקוטי של המחלה הן בגרעין התא והן בציטופלזמה של התא, נוגדנים מוגבלים לאנטיגן מוקדם של EBV, שנקבעו בשיא המחלה רק בציטופלזמה של התא, ונוגדנים לאנטיגן הגרעיני של EBV. השימוש במערכות בדיקה אלו מאפשר אבחון מבדל של מספר מחלות הקשורות ל-EBV.

לאחר בדיקת ELISA חיובית המגלה נוגדנים ל-EBV, מתבצעת תגובת אימונובלוטינג מאשרת, הקובעת את נוכחותם של נוגדנים לחלבוני סמן EBV בודדים (p-proteins): p23, p54, p72 (נוכחות חלבון זה מצביעה על אפשרות של רבייה של EBV), p 138. שיטות המעבדה הנ"ל משמשות גם לניטור יעילות הטיפול.

הרגישות של שיטות וירולוגיות היא 85-100%, הספציפיות היא 100%, זמן המחקר הוא 2-5 ימים. שיטת האימונופלואורסצנציה הישירה (DIF) עם נוגדנים פוליקלונליים או חד שבטיים כנגד HSV-1 ו-HSV-2 משמשת לעתים קרובות בעבודה מעשית. שיטת DIF ניתנת לשחזור בקלות רבה במעבדה קלינית רגילה, אינה יקרה, הרגישות היא מעל 80%, הספציפיות היא 90-95%. מיקרוסקופיית אימונופלואורסצנציה גילתה את נוכחותם של תכלילים ציטופלזמיים, מאפיינים מורפולוגיים, את אחוז התאים הנגועים במריחות-גירודים מהשופכה, תעלת צוואר הרחם, צוואר הרחם, פי הטבעת.

שיטת PIF מספקת מושג על התכונות המורפולוגיות של תאים ושינויים בלוקליזציה של אנטיגני HSV. בנוסף לסימנים ישירים של נזק תאי על ידי נגיפי הרפס (גילוי של לומינסנציה ספציפית), ישנם סימנים עקיפים של זיהום הרפס על פי נתוני PIF:

  • צבירה של חומר גרעיני, ניתוק הקריולמה;
  • נוכחותם של גרעינים המכונים "חור", כאשר נותרה רק קריולמה אחת מגרעין התא;
  • נוכחות של תכלילים תוך-גרעיניים - גופי Cowdry.

בעת ביצוע PIF, הרופא מקבל לא רק הערכה איכותית אלא גם כמותית של מצב התאים הנגועים, בה השתמשנו כדי להעריך את יעילות הטיפול האנטי-ויראלי באציקלוביר (AC). לפיכך, 80 חולים עם הרפס גניטלי פשוט (GH) נבדקו בשיטת PIF דינמית. הוכח שאם לפני הטיפול באציקלוביר, ל-88% מהחולים היה אחוז גבוה של תאים נגועים (50-75% ומעלה) במריחות, אז לאחר טיפול אחד באציקלוביר, תאים בריאים זוהו במריחות של 44% מהחולים, ב-31% מהמקרים, תאים נגועים בודדים נצפו, וב-25% מהחולים היו עד 10% תאים נגועים.

תכולת תאים נגועים במריחות (תגובת PIF) של חולים עם הרפס גניטלי שטופלו באציקלוביר

תקופות של מחלה

אחוז התוכן במריחות

תאים נגועים


תאים רגילים

יותר מ
-75%

50-75%

40-50%

10%

תאים בודדים בשדה הראייה

הישנות (לפני טיפול)

25%

63%

12%

(20)

(50)

(10)

רמיסיה (לאחר טיפול)

25%

31%

44%

(20)

(25)

(35)

במשך שנים רבות, באמצעות PIF ושיטת הכלאת הנקודות, צוין כי תוצאות המחקר חופפות כמעט ב-100% מהמקרים. יש לציין כי על מנת להגביר את מהימנות האבחון של הרפס, במיוחד במקרים של צורות תת-קליניות ודלות ביטוי של הרפס, מומלץ להשתמש ב-2-3 שיטות של אבחון מעבדתי בעבודה, במיוחד בבדיקת נשים בהריון, נשים עם היסטוריה מיילדתית שלילית ואנשים עם אבחנה גינקולוגית לא מוגדרת.

לפיכך, באבחון PCR של זיהומים ויראליים וחיידקיים של מערכת השתן והאוורור, יש צורך להעריך את התוצאות החיוביות שהתקבלו תוך התחשבות באנמנזה, נוכחות (או היעדרות) של תסמינים קליניים ספציפיים של המחלה. אם מתגלה כלמידיה באמצעות PCR, אז במקרה זה קיימת סבירות גבוהה לזיהום וניתן לפתור את סוגיות הטיפול בהתאם. במקרה של גילוי מיקופלזמות (אוריאפלזמות), שהן מיקרואורגניזמים אופורטוניסטיים, נדרשים מחקרים תרבית נוספים כדי לאשר את האבחנה, כלומר, זריעת חומר מהמטופל על תרביות תאים רגישות. רק אם מתקבלות תוצאות חיוביות בניתוח התרבית, ניתן לדבר על אישור מעבדתי של אבחון המיקופלזמוזיס. אותה שיטה תאפשר, במידת הצורך, לקבוע את רגישות המיקופלזמות המבודדות לצורות מינון נפוצות (אנטיביוטיקה, פלואורוקינולונים וכו').

הדבקה בו-זמנית במספר נגיפים ממשפחת ההרפסווירידים אפשרית. לעיתים קרובות זיהינו זיהום של חולה אחד בנגיפי HSV-1, HSV-2 ו-CMV. חולים עם ביטויים קליניים ומעבדתיים של IDS משני (אונקוהמטולוגיים, אונקולוגיים, חולים נגועים ב-HIV) היו נגועים בתדירות גבוהה משמעותית במספר נגיפי הרפס. לפיכך, הוכח כי הפרעות קליניות ואימונולוגיות המתקדמות בזיהום HIV מלוות בעלייה במספר נגיפי ההרפס שזוהו בשיטת ההכלאה המולקולרית. במקרה זה, המשמעותי ביותר מבחינה פרוגנוסטית יכול להיחשב לגילוי מורכב בו-זמני של DNA מסוג HSV-1, CMV ו-HHV-6.

trusted-source[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Translation Disclaimer: The original language of this article is Russian. For the convenience of users of the iLive portal who do not speak Russian, this article has been translated into the current language, but has not yet been verified by a native speaker who has the necessary qualifications for this. In this regard, we warn you that the translation of this article may be incorrect, may contain lexical, syntactic and grammatical errors

You are reporting a typo in the following text:
Simply click the "Send typo report" button to complete the report. You can also include a comment.