המומחה הרפואי של המאמר
פרסומים חדשים
אבחון הרפס
סקירה אחרונה: 07.07.2025

כל תוכן iLive נבדק מבחינה רפואית או נבדק למעשה כדי להבטיח דיוק עובדתי רב ככל האפשר.
יש לנו קווים מנחים קפדניים המקור רק קישור לאתרים מדיה מכובד, מוסדות מחקר אקדמי, בכל עת אפשרי, עמיתים מבחינה רפואית מחקרים. שים לב שהמספרים בסוגריים ([1], [2] וכו ') הם קישורים הניתנים ללחיצה למחקרים אלה.
אם אתה סבור שתוכן כלשהו שלנו אינו מדויק, לא עדכני או מפוקפק אחרת, בחר אותו ולחץ על Ctrl + Enter.
אבחון הרפס מבוסס על בידוד קלאסי של הנגיף בתרביות תאים רגישות, שיטות אימונופלואורסצנציה וסרולוגיה, בדיקה קולפוסקופית ושימוש בשיטות ביולוגיות מולקולריות מודרניות (PCR, הכלאה נקודתית), המאפשרות לאבחן את כל קבוצת נגיפי ההרפס, כולל סוגי HHV-6 ו-HHV-7.
שיטות אבחון מעבדתיות לזיהום הרפס
השיטות העיקריות שמטרתן בידוד HSV או גילוי חלקיקי נגיף ו/או מרכיביהם |
שיטות עזר שמטרתן לזהות נוגדנים ל-HSV בנוזלים ביולוגיים של גוף האדם |
|
|
הוכח כי ב-76% מהחולים הרפס גניטלי (GH) נגרם על ידי HSV-2, וב-24% - על ידי HSV-1. יתר על כן, GH כזיהום יחיד התרחש רק ב-22% מהחולים, ב-78% מהמקרים זוהו קשרים מיקרוביאליים. ב-46% מהנבדקים זוהתה טפיליות הנגרמות על ידי שני פתוגנים, כולל כלמידיה זוהתה ב-40% מהמקרים. גרדנרלה, טריכומונס וגונוקוקים זוהו בתדירות נמוכה יותר במריחות.
ב-27% מהחולים, הטפילים אובחנו על ידי שלושה פתוגנים, ב-5.2% - על ידי ארבעה פתוגנים. יתר על כן, לרוב צוין שילוב של כלמידיה עם גרדנרלה וקנדידה. נתונים אלה מאששים את הצורך בבדיקה בקטריולוגית יסודית של חולים עם הורמון גדילה על מנת לזהות שילובים של גורמים פתוגניים, כמו גם מחקר מעמיק של הפתוגנזה של זיהומים מעורבים של מערכת השתן והאיברי המין, שיאפשר טיפול מורכב מובחן בזיהום הרפס.
חומרים שנחקרו לבידוד HSV בהתאם למיקום הנגעים ההרפטיים
לוקליזציה |
|
גירוד תאים |
נוזל שדרתי (CSF) |
שאיבת סימפונות |
בִּיוֹפְּסִיָה |
דָם |
|||
1 |
2 |
3 |
4 |
||||||
עוֹר |
+ |
+ |
|||||||
עיניים |
+ |
+ |
|||||||
אֵיבְרֵי הַמִין |
+ |
+ |
|||||||
פִּי הַטַבַּעַת |
+ |
+ |
+ |
||||||
פֶּה |
+ |
+ |
+ |
||||||
מערכת העצבים המרכזית |
+ |
+ |
+ |
+ |
|||||
ריאות |
+ |
+ |
+ |
||||||
כָּבֵד |
+ |
+ |
|||||||
|
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
שיטות אבחון מעבדתיות של זיהום ציטומגלווירוס
שיטות |
הזמן הנדרש להשגת תוצאות |
הערות |
וירולוגי |
||
מיקרוסקופ אלקטרונים |
3 שעות |
לא מאוד נגיש |
בידוד וירוסים בתרבית תאים (VCI) |
4-20 ימים |
סטנדרטי, |
צביעת אימונופלואורסצנציה של AG מוקדם באמצעות נוגדנים חד שבטיים |
6 שעות |
פחות |
ציטולוגי |
2-3 שעות |
פחות |
סרולוגי |
||
RSC |
יומיים |
תֶקֶן |
RGA |
יום אחד |
עתיר עבודה |
שׁוּנִית |
6 שעות |
פשוט, |
NRIF |
6 שעות |
קָשֶׁה |
RIMP |
6 שעות |
קָשֶׁה |
ELISA (IgM, DO) |
6 שעות |
מהיר, פשוט |
אימונובלוט |
6 שעות |
יָקָר |
ביולוגי מולקולרי |
||
MG |
5-7 ימים |
יקר, |
PCR |
3 שעות |
יָקָר |
שיטות אבחון של נגיף הרפס זוסטר
|
|
עָקִיף |
|
בְּחִירָה |
תרבית רקמה, עוברי עוף, חיות מעבדה, תרבית משותפת עם תאים מתירניים או וירוסי עזר |
זיהוי של מבודדים |
תגובת ניטרול, RSC, IF, PIEF, תגובת משקעים של בודדים, אגלוטינציה, IF |
יָשִׁיר |
|
ציטולוגיה |
מריחות: אימונופלואורסצנציה צבעונית |
היסטולוגיה |
פתומורפולוגיה של התא |
מִבְנֶה |
מיקרוסקופיה עוברית, מיקרוסקופיה אימונואלקטרונית |
קביעת אנטיגנים |
אם, פיף, רים, IFA |
קביעת ייצור נוגדנים מקומי |
Ig M, Ig G, Ig A: ELISA, RIA |
גישות ביולוגיות מולקולריות |
הכלאה מולקולרית, PCR |
אבחון מעבדתי של זיהום הנגרם על ידי נגיף הרפס זוסטר
|
שיטות |
תוצאות צפויות |
זיהום ראשוני חריף |
1 |
גילוי תוך שעתיים |
2 |
רמות הנוגדנים עולות באיטיות |
|
3 |
מופיע 3 ימים לאחר ההדבקה |
|
זיהום |
1 |
גילוי UUU לאחר שעתיים |
2 |
רמות הנוגדנים עולות באיטיות |
|
4 |
מופיע 4 ימים לאחר הופעת הפריחה |
- קביעת שלפוחיות של VEGF בנוזל;
- סרולוגיה: CSC, ELISA, שמטרתן גילוי
- סרולוגיה: ELISA שמטרתו לזהות IgM;
- סרולוגיה: ELISA שמטרתה לזהות IgA, IgM.
שיטות להצביע על התגובה החיסונית לזיהום בנגיף הרפס זוסטר
גִישָׁה |
שִׁיטָה |
גילוי עלייה בטיטר נוגדנים בסרום השני |
RSK, RTGA, RPGA, תגובת ניטרול IF, RIM, ELISA |
גילוי נוגדנים ספציפיים לסוג Ig G ו-Ig A בדגימת הסרום הראשונה |
ELISA, IF, RIM, אגלוטינציה של לטקס |
פירוש תוצאות הבדיקה הסרולוגית של סרום המטופלים לזיהומי הרפס-וירוס (ELISA)
שם |
ערכי סף ממוצעים לזיהומים |
|
תוצאות הניתוח |
פֵּשֶׁר |
|
ציטומגליה אנטי-CMV IgG (1-20 יחידות/מ"ל) IgM אנטי-CMV (100-300%) |
חיובי 1-6 חיובי 6-10 חיובי >10 |
הפוגה החמרה |
סרוטיפים של הרפס סימפלקס 1,2 |
חיובי 100-400 חיובי 400-800 חיובי >800 |
הפוגה |
הטבלה מציגה את השיטות העיקריות לאבחון מעבדתי של זיהומי הרפס-וירוס, וכן חומרים ביולוגיים מומלצים הנבדקים בעת בידוד HSV, תוך התחשבות בלוקליזציה של נגעים הרפטיים.
בידוד אמין של נגיפי הרפס סימפלקס ו-CMV על ידי הדבקה בתרביות תאים רגישות. לפיכך, במהלך בדיקה וירולוגית של 26 חולים במהלך תקופת ההישנות, בודד HSV בתרבית תאי Vero רגישה ב-23 מקרים (88.4%). תרביות נגועות הראו תמונה של פעולה ציטופתית אופיינית ל-HSV - היווצרות תאי ענק מרובי גרעינים או הצטברות של תאים מעוגלים ומוגדלים בצורת אשכולות. ב-52.1% מהמקרים, מוקדי פעולה ציטופתית של הנגיף ניתן היה לזהות כבר 16-24 שעות לאחר ההדבקה. עד 48-72 שעות של דגירה בתרביות נגועות, אחוז החומרים הגורמים להרס ספציפי של תאים עלה ל-87%. ורק ב-13% מהמקרים זוהו תוצאות חיוביות 96 שעות לאחר ההדבקה או יותר או במהלך מעבר חוזר.
שיטות אבחון מעבדתיות של זיהום הרפס כללי
השיטות העיקריות שמטרתן לזהות (בידוד) נגיפי הרפס, חלקיקיהם ומרכיביהם |
שיטות עזר שמטרתן גילוי נוגדנים לנגיפי הרפס בנוזלים ביולוגיים, גילוי שינויים אנזימטיים בסרום הדם |
בידוד נגיפי הרפס על תרביות תאים ובעלי חיים רגישות. |
מבחן ניטרול |
שיטות סרולוגיות משמשות לאבחון מונונוקלאוזיס זיהומית (זיהום הנגרם על ידי EBV). תגובת פול-בונל עם תאי דם אדומים של ראם, טיטר אבחוני של 1:28 ומעלה בבדיקת סרום דם יחידה, או עלייה פי 4 בנוגדנים בעת בדיקת סרומים מזווגים. נעשה שימוש בתגובת הוף-באואר עם תרחיף 4% של תאי דם אדומים של סוס שעברו פורמלין. התוצאה נלקחת בחשבון לאחר 2 דקות; במונונוקלאוזיס זיהומית, התגובה ספציפית ביותר.
כיום מפותחת שיטת אימונו-אסאי אנזימים (EIA) לאבחון מונונוקלאוזיס זיהומית. במקרה זה, נוגדנים מסוג IgG ו-IgM בסרום של המטופל נקבעים על ידי דגירה עם לימפובלסטים נגועים ב-EBV, ולאחר מכן טיפול בנוגדנים פלואורסצנטיים. בתקופה האקוטית של המחלה, נוגדנים לאנטיגן הקפסיד הוויראלי נקבעים בטיטר של 1:160 ומעלה.
בעת שימוש במספר מערכות בדיקה מסחריות מיובאות, ELISA יכולה לזהות: נוגדנים לנוגדני מעטפת EBV, נוגדנים לאנטיגן מוקדם של EBV, סך הנוגדנים לאנטיגן מוקדם של EBV, שנקבעו בשלב האקוטי של המחלה הן בגרעין התא והן בציטופלזמה של התא, ונוגדנים מוגבלים לאנטיגן מוקדם של EBV, שנקבעו בשלב האקוטי של המחלה הן בגרעין התא והן בציטופלזמה של התא, נוגדנים מוגבלים לאנטיגן מוקדם של EBV, שנקבעו בשיא המחלה רק בציטופלזמה של התא, ונוגדנים לאנטיגן הגרעיני של EBV. השימוש במערכות בדיקה אלו מאפשר אבחון מבדל של מספר מחלות הקשורות ל-EBV.
לאחר בדיקת ELISA חיובית המגלה נוגדנים ל-EBV, מתבצעת תגובת אימונובלוטינג מאשרת, הקובעת את נוכחותם של נוגדנים לחלבוני סמן EBV בודדים (p-proteins): p23, p54, p72 (נוכחות חלבון זה מצביעה על אפשרות של רבייה של EBV), p 138. שיטות המעבדה הנ"ל משמשות גם לניטור יעילות הטיפול.
הרגישות של שיטות וירולוגיות היא 85-100%, הספציפיות היא 100%, זמן המחקר הוא 2-5 ימים. שיטת האימונופלואורסצנציה הישירה (DIF) עם נוגדנים פוליקלונליים או חד שבטיים כנגד HSV-1 ו-HSV-2 משמשת לעתים קרובות בעבודה מעשית. שיטת DIF ניתנת לשחזור בקלות רבה במעבדה קלינית רגילה, אינה יקרה, הרגישות היא מעל 80%, הספציפיות היא 90-95%. מיקרוסקופיית אימונופלואורסצנציה גילתה את נוכחותם של תכלילים ציטופלזמיים, מאפיינים מורפולוגיים, את אחוז התאים הנגועים במריחות-גירודים מהשופכה, תעלת צוואר הרחם, צוואר הרחם, פי הטבעת.
שיטת PIF מספקת מושג על התכונות המורפולוגיות של תאים ושינויים בלוקליזציה של אנטיגני HSV. בנוסף לסימנים ישירים של נזק תאי על ידי נגיפי הרפס (גילוי של לומינסנציה ספציפית), ישנם סימנים עקיפים של זיהום הרפס על פי נתוני PIF:
- צבירה של חומר גרעיני, ניתוק הקריולמה;
- נוכחותם של גרעינים המכונים "חור", כאשר נותרה רק קריולמה אחת מגרעין התא;
- נוכחות של תכלילים תוך-גרעיניים - גופי Cowdry.
בעת ביצוע PIF, הרופא מקבל לא רק הערכה איכותית אלא גם כמותית של מצב התאים הנגועים, בה השתמשנו כדי להעריך את יעילות הטיפול האנטי-ויראלי באציקלוביר (AC). לפיכך, 80 חולים עם הרפס גניטלי פשוט (GH) נבדקו בשיטת PIF דינמית. הוכח שאם לפני הטיפול באציקלוביר, ל-88% מהחולים היה אחוז גבוה של תאים נגועים (50-75% ומעלה) במריחות, אז לאחר טיפול אחד באציקלוביר, תאים בריאים זוהו במריחות של 44% מהחולים, ב-31% מהמקרים, תאים נגועים בודדים נצפו, וב-25% מהחולים היו עד 10% תאים נגועים.
תכולת תאים נגועים במריחות (תגובת PIF) של חולים עם הרפס גניטלי שטופלו באציקלוביר
תקופות של מחלה |
אחוז התוכן במריחות |
|||||
תאים נגועים |
|
|||||
יותר מ |
50-75% |
40-50% |
10% |
תאים בודדים בשדה הראייה |
||
הישנות (לפני טיפול) | 25% |
63% |
12% |
|||
(20) |
(50) |
(10) |
||||
רמיסיה (לאחר טיפול) | 25% |
31% |
44% |
|||
(20) |
(25) |
(35) |
במשך שנים רבות, באמצעות PIF ושיטת הכלאת הנקודות, צוין כי תוצאות המחקר חופפות כמעט ב-100% מהמקרים. יש לציין כי על מנת להגביר את מהימנות האבחון של הרפס, במיוחד במקרים של צורות תת-קליניות ודלות ביטוי של הרפס, מומלץ להשתמש ב-2-3 שיטות של אבחון מעבדתי בעבודה, במיוחד בבדיקת נשים בהריון, נשים עם היסטוריה מיילדתית שלילית ואנשים עם אבחנה גינקולוגית לא מוגדרת.
לפיכך, באבחון PCR של זיהומים ויראליים וחיידקיים של מערכת השתן והאוורור, יש צורך להעריך את התוצאות החיוביות שהתקבלו תוך התחשבות באנמנזה, נוכחות (או היעדרות) של תסמינים קליניים ספציפיים של המחלה. אם מתגלה כלמידיה באמצעות PCR, אז במקרה זה קיימת סבירות גבוהה לזיהום וניתן לפתור את סוגיות הטיפול בהתאם. במקרה של גילוי מיקופלזמות (אוריאפלזמות), שהן מיקרואורגניזמים אופורטוניסטיים, נדרשים מחקרים תרבית נוספים כדי לאשר את האבחנה, כלומר, זריעת חומר מהמטופל על תרביות תאים רגישות. רק אם מתקבלות תוצאות חיוביות בניתוח התרבית, ניתן לדבר על אישור מעבדתי של אבחון המיקופלזמוזיס. אותה שיטה תאפשר, במידת הצורך, לקבוע את רגישות המיקופלזמות המבודדות לצורות מינון נפוצות (אנטיביוטיקה, פלואורוקינולונים וכו').
הדבקה בו-זמנית במספר נגיפים ממשפחת ההרפסווירידים אפשרית. לעיתים קרובות זיהינו זיהום של חולה אחד בנגיפי HSV-1, HSV-2 ו-CMV. חולים עם ביטויים קליניים ומעבדתיים של IDS משני (אונקוהמטולוגיים, אונקולוגיים, חולים נגועים ב-HIV) היו נגועים בתדירות גבוהה משמעותית במספר נגיפי הרפס. לפיכך, הוכח כי הפרעות קליניות ואימונולוגיות המתקדמות בזיהום HIV מלוות בעלייה במספר נגיפי ההרפס שזוהו בשיטת ההכלאה המולקולרית. במקרה זה, המשמעותי ביותר מבחינה פרוגנוסטית יכול להיחשב לגילוי מורכב בו-זמני של DNA מסוג HSV-1, CMV ו-HHV-6.