Karyotyping

עבור המחקר של כרומוזומים, תרבויות דם לטווח קצר משמשים לעתים קרובות, כמו גם תאי מוח העצם ותרבויות fibroblast. הדם נמסר למעבדה עם נוגדי קרישה נתון צנטריפוגה עבור משקעים של כדוריות דם אדומות, ו leukocytes מודגרות במדיום התרבות במשך 2-3 ימים. Phytohemagglutinin מתווסף לדגימת הדם, כפי שהוא מאיץ את התלכדות של אריתרוציטים וממריץ את חלוקת לימפוציטים. השלב המתאים ביותר ללימוד כרומוזומים הוא metaphase של מיטוזה, כך קולצ'יצין משמש כדי לעצור את חלוקת לימפוציטים בשלב זה. הוספת תרופה זו לתרבות מובילה לעלייה באחוז התאים הנמצאים במטאפאזה, כלומר בשלב זה במחזור התא, כאשר הכרומוזומים נראים בצורה הטובה ביותר. כל כרומוזום משכפל (מייצר עותק משלו) ולאחר הצביעה המתאימה ניתן לראות בצורה של שני כרומטידים המצורפים centromere או התכווצות מרכזית. התאים מטופלים אז עם פתרון כלורי נתרן היפוטוני, קבוע ומוכתם.

עבור צובעת כרומוזומים, רומנובסקי- Giemsa לצבוע, 2% acetaminomine או 2% acetazarine משמשים לעתים קרובות יותר. הם כתמים כרומוזומים לחלוטין, אחיד (השיטה השגרתית) והוא יכול לשמש כדי לזהות אנומליות מספריות של כרומוזומים אנושיים.

כדי לקבל תמונה מפורטת של מבנה הכרומוזומים, זיהוי (זיהוי) של כרומוזומים בודדים או מקטעים שלהם, שיטות שונות של מכתים שונים משמשים. השיטות הנפוצות ביותר הן Giemsa, כמו גם G ו- Q- כיפוף. בדיקה מיקרוסקופית של התרופה לאורכו של הכרומוזום מגלה סדרה של להקות מוכנות (הטרוכרומטין) ולא צבועות (euchromatin). הדמות של ההפצה רוחבי המתקבל במקרה זה מאפשר אחד לזהות כל כרומוזום בקבוצה, שכן החלופות פסים ואת הגדלים שלהם הם בודדים וקבועים עבור כל זוג.

לוחות מטאפיז של תאים בודדים מצולמים. כרומוזומים בודדים נחתכים מהתצלומים ומודבקים על גיליון הנייר לפי הסדר; תמונה כזו של כרומוזומים נקראת קריוטיפ.

השימוש מכתים נוספים, כמו גם שיטות חדשות להשגת הכנות כרומוזום, המאפשרים מתיחה של כרומוזומים באורך, להגדיל באופן משמעותי את הדיוק של אבחון cytogenetic.

פותח נומינקלציה מיוחדת לתיאור הקאריאוטיפ האנושי. הקאריאוטיפ הרגיל של גבר ואשה הוא 46, XY ו- 46, XX בהתאמה. בתסמונת דאון, המאופיינת בנוכחות כרומוזום נוסף 21 (trisomy 21), קריוטיפ של נשים מתואר כ 47, XX 21 +, וגברים - 47, XY, 21+. בנוכחות של אנומליה מבנית של הכרומוזום, יש צורך להצביע על זרוע ארוכה או קצרה: האות p מציינת זרוע קצרה, q זרוע ארוכה, ולא טרנסלוקציה. לכן, כאשר הזרוע הקצרה של כרומוזום 5 (תסמונת "חתול-הצרחות") נמחקת, הקאריאוטיפ הנשי מתואר כ- 46, XX, 5p. האם של ילד עם טרנסלוקציה תסמונת דאון - נשא של טרנסלוקציה מאוזנת של 14/21 יש קריוטיפ של 45, XX, t (14q, 21q). כרומוזום הטרנסלוקציה נוצר כאשר הזרועות הארוכות של הכרומוזום 14 ו -21 מתמזגות, בעוד הכתפיים הקצרות אבודות.

כל כתף מחולקת למחוזות, והם בתורם - למקטעים, ואלה ואחרים מיועדים לספרות ערביות. Centromere של כרומוזום הוא נקודת המוצא לספירת אזורים ומגזרים.

לכן, ארבעה סמנים משמשים טופוגרפיה של כרומוזומים: מספר כרומוזום, סמל הכתף, מספר האזור מספר קטע בתוך האזור נתון. לדוגמא, 6p21.3 שיא כלומר אנחנו מדברים על זוג הכרומוזומים ה -6, הזרוע הקצרה שלה, האזור 21, הפלח 3. ישנם עוד תווים אופציונליים, ב pter בפרט - סוף הזרוע הקצרה, qter - סוף הזרוע הארוכה.

שיטת המחקר cytogenetic מאפשר לזהות מחיקות ושינויים אחרים בכרומוזומים רק בגודל של כמיליון בסיסים (נוקליאוטידים).

[1], [2], [3], [4]